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BC-022（人乳腺癌细胞）
生长培养基：DMEM+10% FBS+1% P/S
规格：1×106cells/T25培养瓶
贴壁细胞传代培养：
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基。
2. 加入1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm2培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心200x g/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例：建议 1:6 至 1:9
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
悬浮细胞传代培养：
悬浮细胞的传代可通过补加或置换新鲜培养基的方式来完成，具体做法如下：
1. 取出少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测，当细胞密度达到1×106 cells/mL 时，进行细胞传代培养。
2. 取足量细胞加入到盛有新鲜培养基的培养瓶中，将细胞密度维持在2-3×105cells/mL。
3. 将培养瓶竖直放置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。如果细胞达到传代培养的密度，则进行传代培养。
培养基换液: 每隔2至3天。
注意：培养瓶应使用带滤膜瓶盖以保持培养基与空气和CO2
拆包 & 存储：
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出，并按照下方操作步骤进行培养传代
注意：如为冻存管，请收到后立即解冻培养
培养瓶中细胞操作步骤：
对于贴壁培养的细胞，寄送前，我们会将培养基充满整个培养瓶，以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸，且有些细胞对温度变化也很敏感，可能存在一些细胞脱落漂浮的情况，这些细胞仍是活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁培养的细胞，在生物安全柜环境中，用真空泵去除培养瓶中的多余培养基，至剩余5-8mL左右，随后将细胞置于含有5% CO2的37℃恒温 培养箱中培养。如果细胞已经长满培养瓶，请立即传代。
3. 对于悬浮培养的细胞，在生物安全柜环境中，转移培养瓶中的细胞至离心管中，离心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培养基吹散细胞，转移至新的培养瓶中，随后置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤：
注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
细胞产品的售后政策：
1、收到细胞24小时内出现细菌、真菌、霉菌污染，72小时检测支原体阳性无条件重发；
2、享有1个月的超长售后免责期；
3、1个月内，如果第三方鉴定STR错误，可退细胞款项。
4. 细胞运输途中遭遇的问题：丢件、瓶身破损、培养液渗漏；
5. 细胞污染问题，请在收到产品24小时内，给我们提供真实有效实验结果，供核实；
6. 常温发货的细胞经过24小时静置后，有大部分细胞未存活（需提供真实、清晰的细胞状态照片）
7. 干冰冻存管发货的细胞复苏之后，有大部分细胞未存活（需提供真实、清晰的细胞状态照片）；
关键字： BC-022;人乳腺癌细胞;
上海钰博生物科技有限公司是2012年5月由“海归”组成的创业团队与两个专业投资机构发起成立的，以
开发生产科研试剂和特色检验产品为方向，经过两年多的努力，已经建立了免疫学和分子生物学的五个技术平台，开发了ELISA/ELISpot酶联免疫试剂盒、重组蛋白、荧光标记抗体、四聚体(Tetramer)特异性T细胞检测试剂盒、Aimplex流式高通量多因子检测、microRNA表达谱分析和功能研究等系列产品和服务，与国内外免疫学、干细胞、传染病和肿瘤研究及临床检验领域的科学家们建立了良好的合作关系，形成了一定的品牌影响力。钰博生物另建有七大技术服务平台（ELISA定制服务，免疫学检测服务、分子生物学技术服务、蛋白表达与纯化技术服务、抗体制备技术服务、细胞培养技术服务、整体实验课题服务。用专业的知识、专业的设备、专业的态度为客户提供一站式实验技术服务！