线粒体柠檬酸(MCA)检测试剂盒(分光光度法 50T/48S),Mitochondrial Citric Acid (MCA) Assay Kit (Spectrophotometric 50T/48S)
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线粒体柠檬酸(MCA)检测试剂盒(分光光度法 50T/48S)

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发货地 江苏
更新日期 2025-07-24
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产品详情

中文名称:线粒体柠檬酸(MCA)检测试剂盒(分光光度法 50T/48S)英文名称:Mitochondrial Citric Acid (MCA) Assay Kit (Spectrophotometric 50T/48S)
品牌: 伊势久生物产地: 江苏
保存条件: 按说明书保存纯度规格: 50T/48S
产品类别: 生化试剂盒
检测方法: /种属反应性: /
检测类型: /敲除验证: /
样品类型: /检测时间: /
检测范围: /
2025-07-24 线粒体柠檬酸(MCA)检测试剂盒(分光光度法 50T/48S) Mitochondrial Citric Acid (MCA) Assay Kit (Spectrophotometric 50T/48S) 50T/RMB 伊势久生物 江苏 按说明书保存 50T/48S 生化试剂盒

线粒体柠檬酸(Mitochondrion citric acid, MCA)含量试剂盒说明书

                                                  分光光度法

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。

配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。

测定原理:

CA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。

组成:

产品名称

KC009-25T/24S

KC009-50T/48S

Storage

酸性提取液:液体

25ml

50ml

4℃

碱性提取液:液体

25ml

50ml

4℃

试剂一:液体

7.5ml

15ml

4℃

试剂二:液体

2.5ml

5ml

4℃

试剂三:粉剂

1瓶

1瓶

4℃

标准品:液体

1支

1支

4℃

说明书

一份

KC009-25T/24S:

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入7.5ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存;

标准品:液体1ml×1支,10μmol/ml柠檬酸标准液,4℃保存。

KC009-50T/48S:

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入15ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存。

标准品:液体1ml×1支,10μmol/ml柠檬酸标准液,4℃保存。


自备仪器和用品:

分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml石英比色皿、研钵和蒸馏水。

线粒体中柠檬酸提取:

称0.05~0.1g样品(建议称0.1g样本),加入0.5ml酸性提取液,冰上充分研磨,600g/min 4℃离心5min;取上清至另一EP管中,11000g/min 4℃离心10min,弃上清(取300μl该上清液和300μl碱性提取液中和后可用于细胞质CA含量测定);沉淀即线粒体,向沉淀中加入0.5ml酸性提取液,充分悬浮溶解,超声波破碎(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次),取此溶液300μl和300μl碱性提取液中和,混匀,置冰上待测(不可用于蛋白质含量测定)。

测定步骤:

1、分光光度计预热30 min以上,调节波长到330nm,蒸馏水调零。

2、试剂一、二和三37℃预热10min。

3、样本测定:

空白管和标准管通常只需要各做一个。

试剂名称(μl)

空白管

标准管

测定管

试剂一

300

300

300

蒸馏水

300



标准液


300


样本



300

试剂二

100

100

100

试剂三

300

300

300

充分混匀,330nm立即测定初始吸光值A1和37℃孵育30min后的吸光值A2,ΔA=A2 –A1。

柠檬酸含量计算

(1)按蛋白浓度计算

柠檬酸含量(μmol/mg prot)=[C标准管×(ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ΔA标准管-ΔA空白管) ×V样]÷(V样÷Cpr)=10×(ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ΔA标准管-ΔA空白管)÷Cpr

蛋白质含量需要另外测定。

(2)按样本鲜重计算

柠檬酸含量(μ mol/g鲜重)=[C标准管×(ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ΔA标准管-ΔA空白管) ×V样]÷(W×V样÷V样总)=10×(ΔA测定管-ΔA空白管)÷(ΔA标准管-ΔA空白管)÷W

C标准管:标准液浓度,10μmol/ml; V样:加入反应体系中样本体积,0.3ml;V样总:加入提取液体积,1ml;Cpr:样品蛋白浓度,mg/ml;W:样本质量,g。

注意:最低检测限为10nmol/mg prot或1μmol/g鲜重。



关键字: 线粒体柠檬酸(MCA)检测试剂盒 ;

公司简介

伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司,成立于2019年,坐落于新亚欧大陆桥东方桥头堡连云港市。公司由资深行业专家和双一流高校博士联合创办,主要从事生化检测、病理检测和原料酶等相关试剂的研发和生产。 我司位于联东U谷科技创新谷内的2000平米的生产、研发基地已建成投入运行,其中包括150平米的超十万级的洁净车间。我司坚持以自主研发为核心,现已生产出的脲酶、tRNA转运核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制剂等产品,热销市场以来收到了客户的广泛好评。 公司秉承“ 挚诚科研、匠心传承” 的发展理念,聚焦于前沿生物技术的应用和创新,努力成为生物科技领域的标杆企业。坚持以客户为中心,致力于为中国的科研工作者提供高品质的产品和专业服务,始终是我们努力的目标和方向。
成立日期 2020-01-15 (6年) 注册资本 501万人民币
员工人数 1-10人 年营业额 ¥ 300万-500万
主营行业 化学试剂 经营模式 工厂,试剂
  • 伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
VIP 2年
  • 公司成立:6年
  • 注册资本:501万人民币
  • 企业类型:有限责任公司(自然人投资或控股)
  • 主营产品:转移核糖核酸tRNA、胰蛋白酶抑制剂、葡萄糖氧化酶、二硫苏糖醇DTT、苏木色精、刀豆球蛋白、荧光素钾、组胺、脲酶、脱氧核糖核酸(鲑鱼精)DNA、辣根过氧化物酶、Tris、乙基紫、达旦黄、乙酰胆碱酯酶、硫酸鱼精蛋白、加拿大树胶、X-gal、X-gluc、福林酚、苏木素伊红染色液、迪夫快速染色液、吕氏碱性美蓝染色液、考马斯亮蓝G250染色液、凝血酶原时间(PT)检测试剂盒(一期法)、凝血酶时间(TT)检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)、直链支链总淀粉含量检测试剂盒、抗性淀粉含量检测试剂盒、
  • 公司地址:江苏省连云港市海州区昌意路6号联东U谷连云港科技创新谷B2#01
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