植酸(Saponin )含量试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
植酸又称肌酸、环己六醇六全-二氢磷酸盐,它主要存在于植物的种子、根干和茎中,其中以豆科植物的种子、谷物的麸皮和胚芽中含量最高。植酸作为螯合剂、抗氧化剂、保鲜剂、水的软化剂、发酵促进剂、金属防腐蚀剂等,广泛应用于食品、医药、油漆涂料、日用化工、金属加工、纺织工业、塑料工业及高分子工业等行业领域。
测定原理:
磺基水杨酸-氯化铁溶液显紫红色,在500nm下有最大吸光值。在pH6.0-6.5的环境下,植酸和铁离子结合使溶液颜色变淡,测定吸光度的降低来检测植酸含量。
试剂的组成和配制:
产品名称 | OT018-50T/48S | Storage |
试剂一:液体 | 50ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 25ml | -20℃ |
试剂三:液体 | 50ml | -20℃ |
试剂四:液体 | 15ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
需自备仪器和用品:
可见分光光度计、烘箱、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、金属震荡仪、蒸馏水
植酸提取:
样本烘干,粉碎过筛,称取0.05g,加入1ml试剂一,震荡提取2h;8000g,25℃离心10min,取上清0.5ml,加入0.5ml试剂二,混匀后4℃静置2h,离心取上清待测。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至500nm,蒸馏水调零。
2、测定管:取100μl上清,加入900μl试剂三,混匀后取1500μl加入96孔板,再加入500μl试剂四,充分混匀后,室温下静置5min,后离心取上清1000ul,测定500nm下吸光值A1。
3、空白液配制:取0.5ml试剂一和0.5ml试剂二混匀。
4、空白管:取100μl空白液,加入900μl试剂三,混匀后取1500μl加入96孔板,再加入500μl试剂四,充分混匀后,室温下静置5min,后离心取上清1000ul,测定500nm下吸光值A2。计算ΔA=A2-A1。
植酸含量计算:
标准状态下的回归曲线为:y =4.0568x + 0.0096,R2 = 0.993;X为植酸钠标准品浓度(mg/ml),y为吸光值ΔA(A2-A1)。
植酸含量(mg/g干重)=(ΔA-0.0096)÷4.0568×V反总÷V样÷(W÷V样总) =4.93×(ΔA-0.0096)÷W
V反总:测定液总体积,1ml;V样:加入反应体系中样本体积,0.1ml; V样总:加入提取液总体积,2ml;W:样本干重,g。
注意事项:
若ΔA高于0.4,说明样本植酸浓度过高,需要加空白液适当稀释,并在计算结果中乘以相应的稀释倍数。
关键字: 植酸含量检测试剂盒;
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