苯丙氨酸解氨酶（Phenylalnine ammonialyase，PAL）试剂盒说明书
微量法 100管/96样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
PAL（EC4. 3 1 5）广泛存在于各种植物和少数微生物中，是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶，与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关，在植物正常生长发育和抵御病菌侵害过程中起重要作用。
测定原理：
PAL催化L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在290nm处有最大吸收值，通过测定吸光值升高速率计算PAL活性。
组成：
产品名称 | SR014-100T/96S | Storage |
提取液：液体 | 100ml | 4℃ |
试剂一：液体 | 15ml | 4℃ |
试剂二：粉剂 | 1瓶 | 4℃ |
试剂三：液体 | 1ml | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入4ml蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
自备仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取：
按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至290nm，蒸馏水调零。
准备96孔UV板一块（非普通酶标板，普通酶标板只能透过可见光，不能透过紫外光，检测波长小于340nm务必使用UV板）。
3、在EP管或96孔UV板中按顺序加入下列试剂
试剂名称（μl） | 测定管 | 对照管 |
样本 | 5 |
|
试剂一 | 145 | 150 |
试剂二 | 40 | 40 |
混匀，30℃ 准确反应30min
混匀，静置10min后， 290nm处记录测定管吸光值A1和对照管吸光值A2，△A=A1-A2。
注意：对照管只要做一管
PAL活性计算：
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
按蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白在每ml反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.1为一个酶活性单位。
PAL（U/mg prot）=ΔA×V反总÷（Cpr× V样）÷0.1÷T =13.3×ΔA÷Cpr
按样本鲜重计算
单位定义：每g组织在每ml反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.1为一个酶活性单位。
PAL（U/g鲜重）＝ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.1÷T =13.3×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，0.2ml； V样：加入样本体积，0.005ml；V样总：加入提取液体积，1 ml；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g。
用96孔板测定的计算公式如下
（1） 按蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白在每ml反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.05为一个酶活性单位。
PAL（U/mg prot）=ΔA×V反总÷（V样×Cpr）÷0.05÷T =26.6×ΔA÷Cpr
按样本鲜重计算
单位定义：每g组织在每ml反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.05为一个酶活性单位。
PAL（U/g鲜重）＝ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.05÷T =26.6×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，0.2ml； V样：加入样本体积，0.005ml；V样总：加入提取液体积，1 ml；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g。
关键字： 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 检测试剂盒;
伊势久（江苏连云港）生物科技有限责任公司，成立于2019年，坐落于新亚欧大陆桥东方桥头堡连云港市。公司由资深行业专家和双一流高校博士联合创办，主要从事生化检测、病理检测和原料酶等相关试剂的研发和生产。
我司位于联东U谷科技创新谷内的2000平米的生产、研发基地已建成投入运行，其中包括150平米的超十万级的洁净车间。我司坚持以自主研发为核心，现已生产出的脲酶、tRNA转运核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制剂等产品，热销市场以来收到了客户的广泛好评。
公司秉承“ 挚诚科研、匠心传承” 的发展理念，聚焦于前沿生物技术的应用和创新，努力成为生物科技领域的标杆企业。坚持以客户为中心，致力于为中国的科研工作者提供高品质的产品和专业服务，始终是我们努力的目标和方向。