土壤多酚氧化酶(Solid-Polyphenol oxidase,S-PPO)试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-PPO主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素,完成土壤芳香族化合物循环,用于土壤环境修复。
测定原理:
S-PPO能够催化邻苯三酚产生有色物质,后者在430nm有特征光吸收。
试剂组成和配制:
产品名称 | SSQ005-50T/48S | Storage |
试剂一:粉剂 | 2瓶 | 4℃ |
试剂二:粉剂 | 12ml | 4℃ |
试剂三:乙醚 | 50ml×2(自备) | 4℃ |
说明书 | 一份 |
试剂一:粉剂×2瓶,4℃保存;临用前取一瓶,加入15ml蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂4℃保存一周。
需自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、乙醚100ml(不允许快递)、蒸馏水。
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤:
试剂名称 | 测定管 |
风干土样(g) | 0.05 |
试剂一(μl) | 500 |
振荡混匀,30℃恒温培养1 h |
试剂二(μl) | 200 |
试剂三(μl) | 1750 |
振荡数次,室温静置30min,用蒸馏水调零,取1ml上层液于430nm处测定吸光值A。
注意事项:
1、因乙醚粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上层液里润洗2~3次,再转移测定;
2、乙醚易挥发,转移到比色皿后立即测定,最好一个一个测定)。
S-PPO活力计算:
标准条件下测定的回归方程为y = 8.97x -0.003;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值A。
单位的定义:每天每g土样中产生1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-PPO活力(mg/d /g 土样)=(A+0.003) ÷8.97×V反总÷W÷T=131×(A+0.003)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积2.45ml;W:样本质量,0.05g。
关键字: 土壤多酚氧化酶(S-PPO)检测试剂盒;
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