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The Wieslab补体系统筛选试剂盒是一种酶免疫测定法,用于定性测定功能性经典、MBL和替代补体途径,并测定人血清中的补体缺陷。
这Wieslab补体分析将每种途径的特异性激活与标记抗体的使用相结合,所述标记抗体对作为补体激活结果产生的末端补体复合物C5b-9的新表位具有特异性。产生的C5b-9的量与补体途径的功能活性成比例。
补体系统是先天免疫的核心防线,其中替代途径无需抗体参与,可直接识别病原体表面结构并激活,参与感染防御、炎症调控及组织修复。WIESLAB® Complement kits(补体试剂盒)基于ELISA比色法,通过特异性抗体捕获C5b-9复合物,结合底物显色反应,实现对样本中替代途径激活水平的定量检测。
产品组成(以96孔板规格为例):
- 预包被C5b-9捕获抗体的微孔板(12条×8孔)
- 标准品(含C5b-9重组蛋白,梯度浓度)
- 生物标记的检测抗体(抗C5b-9抗体)
- 链霉亲和素-辣根过氧化物酶(HRP)结合物
- 显色底物(TMB)、终止液、洗涤缓冲液等。
操作流程(约3小时完成):
1. 样本准备:血清/血浆4℃离心(3000g×10min)取上清;细胞培养上清经0.22μm滤膜过滤后备用。
2. 加样孵育:样本/标准品加入预包被板,37℃孵育1小时,结合C5b-9。
3. 洗涤与检测:洗涤去除非特异性结合物,加入标记抗体→链霉亲和素-HRP,37℃孵育30分钟。
4. 显色与读数:加入TMB底物显色(10分钟),终止反应后立即用酶标仪(450nm波长)读取OD值,通过标准曲线计算样本C5b-9浓度。

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