产品介绍
活性氧(ROS)是含氧的高活性化学分子,包括超氧化物、羟自由基、单线态氧和过氧化物等。这类分子因外层电子未配对而具有极强的反应活性,既是氧代谢的天然副产物,又在细胞信号传导和稳态调节中发挥重要作用。
ROS Brite™ DHCF探针具有与2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯相似的氧化还原特性,但其光谱显著红移。该探针可被细胞酯酶水解为无荧光的还原形式,随后被H2O2氧化为高荧光性染料。它能响应多种在氧化应激时增强的氧化反应,适用于:1)监测细胞氧化还原过程;2)与FITC标记抗体或GFP细胞系进行多重检测。其氧化产物在细胞内呈现强荧光,为病理条件下的氧化应激研究提供了重要工具。
实验方案
本方案仅供参考,需根据具体实验需求进行调整。在配制ROS Brite™工作液前,请先完成对细胞或动物的预处理。
实验步骤
1.储备液配制:使用DMSO配制10-20 mM ROS Brite™储备液,用含20 mM Hepes缓冲液的Hanks平衡盐溶液(HHBS)稀释至5-10 µM工作浓度
2.样本预处理(示例:RASM细胞可用50-100 nM血管紧张素II处理3-5小时)
3.加入步骤1配制的ROS Brite™工作液(5-10 µM),37°C孵育15-30分钟
*注:最合适的浓度因细胞系而异(如货号16053建议使用0.5-5 µM),需通过预实验确定*
4.移除染液,用HHBS缓冲液洗涤
5.选用荧光显微镜、流式细胞仪、活体成像进行荧光检测
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
关键字: AAT Bioquest;活性氧; ROS Brite DHCF;
西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的高新技术企业;主要以荧光探针,分子探针,核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心,产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪,抗体标记、新药筛选等领域。