EnkiLife Fluor555标记试剂盒包含标记抗体蛋白的多个组分,如高性能的Fluor555荧光染料、纯化用超滤离心管、洗脱标记缓冲液、标记蛋白保存液等,可轻松可靠地标记抗体、蛋白质和其他分子,以便用作荧光探针。
快速:标记反应时间需约30分钟,同时兼顾标记效果和标记效率
简便:每只染料试剂已优化设计好对应的抗体量,无需繁琐计算,按照步骤操作即可获得良好效果
灵活:对大规格试剂盒中的染料进行分装,批次性能一致,方便多次使用
标记效果突出:优化的标记缓冲液使标记位点相对固定,增强标记后抗体的同质性
胺特异性标记:Fluor555上的活性基团能高效地结合抗体或其他纯化蛋白质上的伯胺基团,从而实现染料和抗体的共价标记结合
标记蛋白:主要针对IgG类抗体,和IgG抗体类似大小及性质的蛋白也可标记
Fluor555是一种橘黄色-橙红色荧光染料,是Cyanine3的类似物,常用于代替Cyanine3、TAMRA染料使用。Fluor555染料的极性很大,水溶性强,荧光亮度和荧光稳定性也极好,是蛋白/抗体标记的良好染料。从化学结构上看,Fluor555的母核是花菁素Cyanine3,但是母核上带有多达4个磺酸根基团,四磺酸结构让其具有极度亲水性,染料标记到蛋白表面后,不会改变蛋白表面极性,降低了蛋白疏水化聚集沉淀的风险,同时极大降低了染料局部靠近而荧光淬灭的概率,因此Fluor555标记后的蛋白往往发出更强的荧光。
类似染料:Alexa Fluor® 555,ATTO 550,Cy®3,Cyanine3, DyLight® 549, TRITC
常用激发光源:532 to 568 nm
最大激发波长:555 nm
最大发射波长:572 nm
摩尔消光系数:150000 L/(mol·cm)
量子产率:0.1
外观:红色固体
* 超滤管分子量截留值50KDa** 1 set = 1个超滤管和收集管
在一定的化学反应条件下,荧光染料活化基团专一性与抗体蛋白上的伯胺基反应,形成稳定的酰胺键,从而实现与抗体蛋白的标记偶联。
1、超滤换液浓缩
2、标记反应
3、纯化
4、DOL计算,收集保存
标记二抗作为免疫荧光探针,实现比Cy3更好的检测效果
标记Annexin V进行细胞凋亡检测
标记甲流NP蛋白抗体,与量子点标记乙流抗体构建侧向流层析试纸条
标记钙调蛋白(Calmodulin),监测神经元活动引发的钙闪烁波
标记β-微管蛋白(β-Tubulin),实时追踪有丝分裂期纺锤体组装过程
标记Tyramide用于低丰度靶标(如PD-L1)检测,提高肺癌活检灵敏度
4%多聚甲醛固定的大鼠肝癌组织免疫荧光检测(IF)
一抗:SMA小鼠单抗,1:400稀释A:国内知名厂商 555-山羊抗小鼠IgG(H+L)0.5mg/ml,1:200稀释B:EnkiLife Fluor555标记试剂盒(SKU:RE80012p) ,标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)0.5mg/ml,1:200稀释
4%多聚甲醛固定的小鼠脑组织免疫荧光检测(IF) (直接法)
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