产品简介
本试剂盒可以分别检测出GSH(还原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽，oxidized glutathione disulfide)含量。谷胱甘肽(glutathione)是一种由3个氨基酸残基组成的小肽，全称为谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸，英文名称为glutamyl-cysteinylglycine，简称为glutathione。由于半胱氨酸上的巯基(SH)为谷胱甘肽的活性基团，所以常简写为G-SH或GSH。谷胱甘肽包括还原型谷胱甘肽(reduced glutathione，常称为GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione disulfide)两种形式。由于氧化型谷胱甘肽是由两个GSH通过巯基脱氢而成，所以常简写为G-S-S-G或GSSG。还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源，对于维持蛋白质中巯基适当的氧化还原状态有重要作用，并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。总谷胱甘肽中通常 90-95%为还原型谷胱甘肽。
产品特点
★本试剂盒检测下限为0.5μM，可以检测动物组织、血浆、红细胞、和培养细胞或其它适当样品中GSH和GSSG的含量。
★本试剂盒提供了蛋白去除试剂M，可以更加准确地测定含有蛋白的样品。
检测原理
通过谷胱甘肽还原酶把GSSG还原成GSH，而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG。适当配制反应体系，前后两个反应合并起来后，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素，总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定412nm处的吸光度值就可以计算出总谷胱甘肽的量。用适当试剂先清除样品中的GSH，然后利用上述反应原理就可以测定出GSSG的含量。用总谷胱甘肽(GSSG+GSH)的量扣除GSSG的含量，就可以计算出GSH的含量。
本试剂盒的具体反应原理如下：
两个反应相合并：
产品组分
编号 | 产品名称 | 包装规格（100T） | 保存方式 |
试剂一 | 总谷胱甘肽检测缓冲液 | 60ml | -20℃ |
试剂二 | 谷胱甘肽还原酶 | 150μl | -20℃ |
试剂三 | 氧化型谷胱甘肽(GSSG) | 5mg | -20℃，GSSG配制成溶液，分装，-20ºC保存至少3个月有效 |
试剂四 | DTNB | 4.5mg | -20℃，DTNB溶解于DMSO后，分装，-20ºC保存至少3个月有效。 |
试剂五 | 蛋白去除试剂M | 1g | -20℃，蛋白去除试剂M配制成溶液后仅限当天使用。 |
试剂六 | NADPH | 4mg | -20℃，NADPH溶解，分装，-70ºC保存。 |
试剂七 | DMSO | 1.5ml | -20℃ |
试剂八 | GSH清除试剂 | 500μl | -20℃，GSH清除试剂溶液须新鲜配制使用。 |
耗材一 | 96 孔酶标板 | 1 板 | RT |
耗材二 | 96 孔覆膜 | 2 张 | RT |
保存条件
未拆封的试剂盒可在 -20℃保存12个月。
注意事项
1. 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。特别是DTT、巯基乙醇等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定，请尽量避免。
2. 一定要严格控制反应时的温度和反应时间，否则每次都需做标准曲线。
3. NADPH等试剂不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。
4. 蛋白去除试剂M溶液必须新鲜配制并限当日使用。GSH清除试剂也须新鲜稀释后使用。
5. 蛋白去除试剂M较难溶解，可以通过剧烈vortex并适当加热(不超过37ºC)以促进溶解。
6. DMSO在4ºC、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。
7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
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