产品简介
G6PDH可催化葡萄糖-6-磷酸(glucose-6-phosphate，G6P)转化为6-磷酸葡萄糖酸内脂(6-phosphoglucon ate，6-PG)，这是磷酸戊糖途径(pentose phosphate pathway，PPP)的第一个步骤，也是该途径的限速步骤。磷酸戊糖途径对于NADPH(还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，也称为还原型辅酶II)和戊糖的生成至关重要。NADPH对于通过GSH的再生来调控氧化还原平衡以及脂肪酸生物合成来说都至关重要。所以G6PDH的缺乏会导致由于不能生成NADPH而引起的一些疾病，如新生儿黄疸、非免疫性溶血性贫血等。
产品特点
★ WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其他MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT被一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。
★ WST-8和MTT、XTT等相比，线性范围更宽，灵敏度更高。
★ WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。
★ 本试剂盒使用便捷，灵敏度高，线性范围宽。可以每孔含量低至0.05mU的G6PDH，1mU/ml(0.05mU/孔)至500mU/ml(25mU/孔)之间呈现良好的线性关系。使用细胞、组织等的裂解液即可进行检测，无需分离纯化细胞、组织或其它样品中的G6PDH。
检测原理
G6P在G6PDH的作用下氧化生成6-PG，在这一反应过程中NADP+被还原为NADPH，生成的NADPH在电子耦合试剂1-mPMS(1-Methoxy-5-methylphenaziniumMethylSulfate)的作用下将WST-8还原生成橙黄色的formazan，在450nm左右有最大吸收峰。反应体系中生成的formazan与样品中G6PDH的活性呈正比关系。WST-8法检测G6PDH的原理参考下图：
产品组分
编号 | 产品名称 | 包装规格（100T） | 保存方式 |
试剂一 | 反应缓冲液 | 5.5ml | -20℃ |
试剂二 | G6PDH底物 | 220μl | -20℃ |
试剂三 | 显色液 | 220μl | -20℃，需避光保存。 |
试剂四 | G6PDH(0.25U/μl) | 25μl | -20℃ |
试剂五 | G6PDH提取液 | 50ml | -20℃ |
耗材一 | 96 孔酶标板 | 1 板 | RT |
耗材二 | 96 孔覆膜 | 2 张 | RT |
保存条件
未拆封的试剂盒可在 -20℃保存12个月。
注意事项
1. 经检测本试剂盒中的G6PDH(细菌来源)室温存放72小时或反复冻融5次不影响其酶活性。但对于不同物种的G6PDH是否能耐受长时间的室温存放或反复冻融须自行测试，初次检测时尽量使用新鲜制备的样品。
2. 由于G6PDH提取液略显粘稠，以该提取液作为稀释液时，无论对标准品还是样品进行稀释，在稀释过程中务必确保稀释均匀，否则易造成实验数据产生较大波动。
3. 在样品加样和混匀过程中，须尽量避免产生气泡，以免影响最终的吸光度测定。
4. 如果需要测定样品中G6PDH的绝对活力而又不能非常严格地控制反应温度和反应时间，则每次检测都需要设置标准曲线。
5. 如果样品溶液中G6PDH活性过高或过低，不在试剂盒的线性检测范围内时，可适当调整样品或者提取液的用量。
6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
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