产品简介
谷丙转氨酶,也称为丙氨酸氨基转移酶,主要分布在动物肝脏中,同时也存在于植物、微生物和培养细胞中,对氨基酸代谢至关重要。在肝脏疾病诊断中,肝细胞损伤会导致谷丙转氨酶从细胞内释放到血液中,从而引起血清中谷丙转氨酶活性升高。因此,谷丙转氨酶是评估肝脏功能损害的敏感和常用指标。
检测原理
谷丙转氨酶(ALT)在37℃及pH 7.4条件下,作用于丙氨酸及α-酮戊二酸组成的底物,生成丙酮酸及谷氨酸。反应30 min后(固定时间)加入2,4-二硝基苯肼(DNPH)盐酸溶液,既中止反应,同时DNPH与酮酸中羰基加成,生成丙酮酸苯腙。苯腙在碱性条件下呈红棕色,于510 nm测定吸光度并计算酶活力。
产品组分
编号 | 产品名称 | 包装规格(100T) | 保存方式 |
试剂一 | 底物基质液 | 5mL | -20℃,开瓶后2-8℃保存。 |
试剂二 | 显色剂 | 5mL | -20℃,开瓶后2-8℃避光保存。 |
试剂三 | 碱溶液 | 5mL | -20℃,开瓶后2-8℃保存。 |
试剂四 | 2μmol/mL丙酮酸钠标准品 | 0.5mL | -20℃,开瓶后2-8℃保存。 |
试剂五 | 缓冲液 | 0.5mL | -20℃,开瓶后2-8℃保存。 |
耗材一 | 96 孔酶标板 | 1 板 | RT |
耗材二 | 96 孔覆膜 | 2 张 | RT |
保存条件
未拆封的试剂盒可在 -20℃保存12个月,开瓶使用后可在2-8℃保存6个月。
注意事项
1. 比色法中常用的有赖氏(Reitman-Frankel)法及金氏(King)法。赖氏法标准曲线所定单位数,是用实验方法和卡门氏分光光度法(速率法)作对比测定求得的。以卡门氏单位报告结果,比较准确。
2. 卡门氏单位定义:1mL液体,反应液总容量成3mL,波长340nm,1cm光径,25℃,1min内所生成的丙酮酸,使NADH氧化成NAD+而引起吸光度每下降0.001为一个单位(1卡门氏单位=0.482 U/L,25℃)。
3. 一般血清标本内源性酮酸很少,血清对照孔吸光度值接近试剂空白孔(以双蒸水代替血清,其他和对照孔同样操作)。所以,成批标本测定时,一般不需要每一标本都作本身血清对照孔,以试剂空白孔代替即可,但对脂血、黄疸或溶血血清,每份标本应作对照孔。
4. 酶活力超过150卡门氏单位时,用生理盐水稀释血清后重测。
5. 应将一般血清的对照孔(或称标本空白孔)的吸光度作为日常质控的指标之一;如相差大,可考虑α-酮戊二酸浓度、DNPH浓度及仪器等原因引起。
6. 血清中ALT在室温(25℃)可保存2天,在0~4℃可保存一周,在-25℃可保存1个月。
7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
关键字: Alanine;Aminotransferase;ALT/GPT;Activity;Assay;Kit;谷丙转氨酶活性;试剂盒
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