GC-2 SPd(ts)小鼠精母细胞系
英文名称 | GC-2 SPd(ts):GC2SPdts | 规格 | 1×106 |
货号 | XG-X3634 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
基本特性:
该细胞系来源于一6周龄的雄性BALB/c小鼠 新鲜分离的精母细胞通过共转染SV40大T抗原基因 (Psv3neo) 和温度敏感的p53抑癌基因突变 (LTRp53cG9)，建立获得GC-spd(ts) 细胞株。该细胞经G418筛选，培养6个月并经有限稀释法形成单细胞克隆三次。目前，该细胞已丧失其分化潜能，处于减数分裂前期。细胞含有乳多空病毒（papovavirus）
细胞特性
1） 来源： 小鼠精母细胞；SV40大T抗原转染
2） 形态：上皮细胞样 贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
一、来源与构建背景
起源与转染方法
该细胞系来源于6周龄雄性BALB/c小鼠的新鲜精母细胞，通过共转SV40大T抗原基因（pSV3neo温度敏感型p53抑癌基因突变体（LTRp53cG9建立[][][]。转染后经G-418筛选6个月，并通过有限稀释法克隆3次单细胞，最终获得永生化细胞株。
关键基因修饰
SV40大T抗原：赋予细胞增殖能力，突破正常细胞分裂周期限制。
p53突变体：通过温度敏感型设计（33℃活化、39℃失活），在特定条件下调控细胞周期检查点。
二、细胞特性与培养条件
形态与生长特性
形态：上皮样贴壁细胞，呈铺展生长。
生长周期：倍增时间约24-48小时，推荐传代比例1:2至1:5，密度达80%-90%时需传代。
冻存特性：推荐冻存液90FB10DMSO，复苏后存活率>90%。
培养体系
基础培养基：DMEM或RPMI-1640，含10%胎牛血清（FBS）、1%青霉素-链霉素（P/S）。
培养环境：37℃、5CO、饱和湿度，部分文献建议33℃培养以维持p53活性。
支原体检测：常规检测为阴性，需定期验证。
三、应用领域
精子发生机制研究
模拟减数分裂前阶段（premeiotiarrest），用于研究精子形成中的基因调控（如cAMP信号通路）和表观遗传修饰。
分析精母细胞凋亡与自噬的分子机制，例如通过Caspase-3/7活性检测。
药物筛选与毒性评估
作为睾丸毒性模型，评估化学物质（如顺铂）对生殖细胞的影响。
筛选促精子发生药物，如抗氧化剂（N-乙酰半胱氨酸）或生长因子（IGF-1）。
基因功能研究
构建基因敲除/过表达模型，研究睾丸发育相关基因（如Stra8、Piwil2）的功能。
研究端粒酶活性与细胞永生化的关系。
公司出售的产品：
咖啡环（cyclamate）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 | AF680标记的细胞角蛋白19单克隆抗体 |
真菌/酵母细胞内氧化应激活性氧（ROS）光泽精化学发光法 | 激肽释放酶3/舒血管素3抗体 |
冰冻切片抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性染色试剂盒 | PE标记小鼠CD3e单克隆抗体 |
组织钙调神经磷酸酶（CALCINEURIN；PP2B）活性定磷比色法定量检测试剂盒 | 同源盒蛋白D1抗体 |
动物细胞/组织磷酸葡萄糖酸脱氢酶（phosphogluconate dehydrogenase；PGD）电泳分析试剂盒 | FAM154A蛋白抗体 |
蛋白表达西方杂交分析试剂盒-LEPTIN | AF700标记小鼠CD45R单克隆抗体 |
PAR-3蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 膜相关蛋白17抗体 |
转基因棉花MON531品系基因检测试剂盒 | 登革热病毒2糖蛋白NS1抗体 |
冰冻切片组织EGFR 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 胰岛素样生长因子结合蛋白2抗体 |
果菜抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 磷酸化5-脂氧合酶抗体 |
大鼠ERβ基因甲基化检测试剂盒 | α肌萎缩糖蛋白2抗体 |
组织HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒 | 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 |
细胞SPHK2激酶活性比色法定量检测试剂盒（510） | GC-2 SPd(ts)小鼠精母细胞系HLA DPB1抗体 |
组织半胱-12（CASPASE-12）活性荧光定量检测试剂盒 | 乳糖神经酰胺4-α-半乳糖基转移酶抗体 |
RPMI 1640完全培养液（无抗生素） | 高尔基体卷曲螺旋蛋白1抗体 |
增强型HRP－DAB底物显色试剂盒 | 转钴胺素蛋白2抗体 |
注意事项：
污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。
霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。
支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。
操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。
未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。
运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。
常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。
关键字： GC-2 ;小鼠精母细胞系;GC-2 SPd(ts):GC2SPdt;
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