L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞
英文名称 | L Wnt-3A:LWnt3A | 规格 | 1×106 |
货号 | XG-X3653 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
基本特性:
L Wnt-3A细胞是由L-M(TK-)细胞用Wnt-3A表达载体转染并在含G418的培养基中筛选出的稳转株。Wnt-3A基因编码一个有变异的信号功效分泌性糖蛋白，Wnt基因控制胚胎发过程中的许多模式形成和生长事件。
L Wnt-3A细胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白，L Wnt-3A细胞是目前生产Wnt-3A条件培养基的最好来源。由于这种条件培养基还包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，对于涉及Wnt-3A条件培养基的实验有必要用其来源细胞株作对照。
1细胞来源与背景
起源：
母系细cell源C3H/An小的皮下结缔组织（成纤维细胞样细胞）。
L-Wnt-3是通过转Wnt-3基因（小Wnt3cDNA）获得的稳定表达细胞系。
Wnt-3的作用：
Wnt-3是一种分泌型糖蛋白，可激经典Wnt/β-catenin信号通路，促进细胞增殖、干细胞自我更新和分化调控。
该细胞系常用制备Wnt-3A条件培养基（Wnt3a-CM），用于培养胚胎干细胞（ESCs）、肠道类器官等。
2生物学特性
（1）细胞形态
贴壁生长，呈梭形或星形（典型成纤维细胞样形态）。
分泌特性：持续分活性Wnt-3A蛋至培养基中。
（2）分子标志物
Wnt-3高表达（可通过Westerblot或ELISA检测）。
Wnt通路下游靶基因（如β-catenin、Axin2）可能被激活。
（3）功能特性
支持干细胞培养：其条件培养基（Wnt3a-CM）可替代重组Wnt-3A蛋白，维持胚胎干细胞或肠道干细胞的干性。
肿瘤相关研究：Wnt信号异常激活与结直肠癌等肿瘤相关，该细胞可用于机制研究。
3研究应用
Wnt信号通路研究
分析Wnt/β-catenin通路的激活或抑制机制。
研究Wnt3A对细胞增殖、分化的影响。
干细胞培养
制Wnt3a条件培养基（用于ESCs、肠道类器官、肝祖细胞等）。
癌症研究
探索Wnt信号在结直肠癌、乳腺癌等肿瘤中的作用。
药物筛选
测试Wnt抑制剂（如XAV939、IWP-2）或激动剂的效果。
4培养条件
（1）基础培养基
DMEM（高糖10胎牛血清（FBS1青霉素/链霉素。
特殊需求：如需增强Wnt-3A分泌，可降低血清浓度（如5FBS）。
（2）培养条件
温度：37°C，5CO。
传代方法：
PBS洗涤后，0.05胰蛋白酶-EDT消化1-2分钟。
加入含血清培养基终止消化，离心（100rpmmin）后重悬。
按1:3~1:5比例传代，2-3天换液一次。
（3）Wnt3a条件培养基（Wnt3a-CM）制备
培养L-Wnt-3A细胞至70%融合。
更换为低血清培养基（如DME0.5FBS）。
培养48-72小时后收集上清，离心（200rpm1min）去除细胞碎片。
过滤除菌（0.2μm滤膜），-80°C保存备用（可稳定数月）。
公司出售的产品：
1% phosphotungstic acid 溶液 | 微管相关同源蛋白TPX2单克隆抗体 |
（ZIEHL-NEELSEN）原位直接染色试剂盒 | 肌动蛋白结合蛋白IPP抗体 |
组织单胺氧化酶（MAO）总活性化学发光法定量检测试剂盒 | PE-Cy7标记人CD105单克隆抗体 |
细胞MKK6激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 髓系细胞触发受体样转录因子2抗体 |
组织HSV（HERPES SIMPLX）病毒定性检测试剂盒 | EBV立即早期基因BRLF1抗体 |
免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒（含AP一抗） | 6号染色体开放阅读框226抗体 |
石蜡切片组织TNF ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 磷脂转移蛋白抗体 |
酒类L－苹果酸比色法定量检测试剂盒 | 胆固醇酰基转移酶2抗体 |
冰冻切片组织CASPASE-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 血清淀粉样蛋白4抗体 |
蜂蜜木糖醇比色法定量检测试剂盒 | 赖氨酸tRNA的连接酶抗体 |
活体细胞半胱13（CASPASE-13）活性原位荧光染色检测试剂盒 | TTC33蛋白抗体 |
细菌D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 | 细胞周期调控因子P78抗体 |
组织BLK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞G蛋白偶联受体15抗体 |
血液氧化型甘肽（GSSG）浓度比色法定量检测试剂盒 | 人类疱疹病毒8 ORF14抗体 |
DAPI简易细胞核形态染色试剂盒 | 钙稳态内质网蛋白抗体 |
通用型1毫升1厘米光径石英比色皿 | 肿瘤坏死因子-α/TNFα/TNF-α抗体 |
注意事项：
污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。
霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。
支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。
操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。
未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。
运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。
常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。
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