Cy5-亚油酸,CY5-Linoleic acid,Cyanine5-Linoleic acid,Cy5 - 亚麻油酸,Cy5-(9Z,12Z)-9,12 - 十八碳二烯酸,Cy5-LA
Cy5 染料:属于菁染料家族,激发波长约 649 nm,发射波长约 670 nm,位于近红外光区域,具有低背景荧光干扰、高组织穿透性和较好的光稳定性。
亚油酸:一种 ω-6 必需脂肪酸,含两个双键(C18:2n-6),是细胞膜磷脂的重要组成部分,参与能量代谢、信号传导及免疫调节等生理过程。
偶联方式:通常通过酰胺化反应将 Cy5 的 NHS 酯活性基团与亚油酸的羧基连接,形成稳定的酰胺键。部分产品可能采用直链 Cy5 结构,合成更简便但信号强度略低于环状结构。
活化 Cy5 染料:将 Cy5 分子修饰为 NHS 酯形式(如 Cy5-NHS),使其具备与羧基反应的活性。
偶联反应:在适当的缓冲液(如 MES 或 HEPES)中,将活化的 Cy5-NHS 与亚油酸混合,调节 pH 至中性(pH 7.0-8.5),室温下反应数小时。
纯化与表征:通过透析、凝胶过滤或 HPLC 去除未反应的染料和副产物,最终产物纯度通常≥95%。产物可通过 UV-Vis 光谱(检测 Cy5 特征吸收峰)和质谱验证结构。
荧光性能:激发 / 发射波长约 649/670 nm,适用于近红外荧光成像系统,可实现深层组织(如小鼠肿瘤模型)的高分辨率追踪。
生物相容性:Cy5 标记对亚油酸的生物学活性影响较小,例如在细胞实验中,Cy5-LA 仍可通过脂肪酸转运体被摄取并参与脂滴形成。
稳定性:
化学稳定性:在避光、干燥条件下,-20℃可长期保存;需避免与强氧化剂接触,防止亚油酸双键氧化。
生物稳定性:在生理条件下(如细胞培养基或动物体内)不易被酶解,可稳定存在数小时至数天。
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