罗丹明标记昆布五糖/RB-Laminaripentaose/罗丹明B-β-1,3-葡聚五糖/Rhodamine B-Laminaripentaose/RB-LP5 / LP5-RB/Laminaripentaose-Rhodamine B conjugate/荧光标记β-葡聚糖探针
罗丹明标记昆布五糖”(Rhodamine-Laminaripentaose 或 RB-Laminaripentaose)指的是一种将罗丹明(Rhodamine, RB)荧光染料共价连接到昆布五糖(Laminaripentaose) 分子上的化学偶联物。
昆布五糖 (Laminaripentaose):
是由五个葡萄糖分子通过 β-1,3-糖苷键连接而成的寡糖。
它是β-1,3-葡聚糖(一种广泛存在于真菌细胞壁、某些藻类和植物中的多糖)的基本结构单元或降解片段。
因此,它可作为研究β-1,3-葡聚糖相关生物过程的模型分子。
罗丹明 (Rhodamine, RB):
是一类红色或橙红色荧光染料(如常见的罗丹明B、罗丹明6G、TRITC等),具有高荧光量子产率和良好的光稳定性。
其异硫氰酸酯衍生物(如TRITC)能与分子中的氨基(-NH₂)发生特异性反应,形成稳定的硫脲键,常用于生物分子的荧光标记。
为了实现标记,通常需要:
在昆布五糖分子上引入一个化学连接臂(linker),该连接臂末端带有一个伯氨基(-NH₂)。
使用罗丹明异硫氰酸酯(如TRITC)与该氨基反应,形成共价偶联。
通过色谱等方法纯化产物,得到纯净的 RB-Laminaripentaose。
这种荧光标记的寡糖探针在以下领域有重要价值:
模式识别受体(PRR)研究:
受体结合实验: 通过荧光显微镜或流式细胞术,观察探针与细胞表面Dectin-1的结合。
受体定位与内化研究: 追踪受体-配体复合物的内吞过程和细胞内运输路径。
竞争性结合实验: 验证其他分子是否能阻断Dectin-1与β-葡聚糖的结合。
真菌的β-1,3-葡聚糖是重要的病原体相关分子模式(PAMP)。
宿主免疫细胞(如巨噬细胞、树突状细胞)表面的模式识别受体,如Dectin-1,能特异性识别β-1,3-葡聚糖。
RB-Laminaripentaose 可作为 Dectin-1 的特异性配体探针。
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