小鼠肌肌酸激酶(CKM)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液及培养上清等样本中的肌肌酸激酶（CKM，别名CK-MM、CK3）。其检测范围为1.56-100 ng/mL，灵敏度为0.55 ng/mL，适用于科研及临床前研究。

试剂盒组成

| 组分 | 规格（48T/96T） | 储存条件 |

| 预包被酶标板 | 8×6孔/8×12孔 | 4℃ |

| CKM标准品 | 1或2瓶（冻干/液体） | 4℃ |

| 标准品稀释液 | 5 mL/10 mL | 4℃ |

| 样品稀释液 | 5 mL/10 mL | 4℃ |

| HRP标记检测抗体 | 60 μL/120 μL | 4℃ |

| 抗体稀释液 | 5 mL/10 mL | 4℃ |

| TMB显色液（A/B组） | 2.5 mL/5 mL（A组） | 避光4℃ |

| 终止液 | 5 mL/10 mL | 室温 |

| 洗涤缓冲液（20×） | 25 mL/50 mL | 4℃（稀释后室温保存） |

实验步骤

样本准备

血清/血浆：离心去除颗粒物，避免反复冻融。

组织匀浆：PBS缓冲液匀浆后离心取上清。

稀释要求：若样本浓度超出检测范围，需用样品稀释液梯度稀释。

标准品复溶

使用标准品稀释液溶解冻干标准品，静置10分钟后混匀，按说明书梯度稀释。

加样与孵育

每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

洗板：弃液体，每孔加300 μL洗涤缓冲液，静置30秒后弃去，重复5次。

抗体孵育

加入100 μL HRP标记检测抗体（1:100稀释），37℃孵育60分钟，再次洗板。

显色与终止

每孔加入90 μL TMB显色液，避光反应15-20分钟。

加入50 μL终止液，颜色由蓝转黄。

检测

450 nm波长下读取吸光度（OD值），630 nm为校正波长。

注意事项

质量控制

建议每板设置复孔及空白对照，CV值应＜15%。

质控血清靶值需在预期范围内，否则需重复实验。

操作要点

加样时避免气泡，更换枪头防止交叉污染。

显色时间需严格控制，避免过度反应导致背景升高。

储存与稳定性

未开封试剂盒在2-8℃保存有效期内稳定；开封后组分需按标签条件存放。

避免反复冻融标准品或样本。

技术参数

检测范围：1.56-100 ng/mL（可定制扩展）。

批内差异：＜10%；批间差异：＜12%。

特异性：不与小鼠其他肌酸激酶亚型（CK-BB、CK-MB）交叉反应。

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