人半胱氨酸蛋白酶抑制剂S(CST4)ELISA试剂盒 新品

商品属性

规格：96T/48T

检测方法：双抗体夹心法

保存条件：2-8℃避光保存，有效期12个月

产品简介

本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物液体中 半胱氨酸蛋白酶抑制剂S（Cystatin S, CST4） 的浓度。CST4是一种唾液腺分泌的蛋白酶抑制剂，与口腔疾病、肿瘤等研究相关。

检测原理

采用双抗体夹心ELISA法：

预包被抗人CST4单克隆抗体于微孔板。

样本中的CST4与捕获抗体结合，再加入生物素标记的检测抗体。

通过链霉亲和素-HRP与生物素结合，加入TMB显色。

终止反应后，450nm波长下测定吸光度（OD值），浓度与OD值成正比。

试剂盒组成

| 组分 | 96T规格 | 48T规格 |

| 预包被微孔板 | 1块（96孔） | 1块（48孔） |

| CST4标准品（冻干） | 2管（10ng/mL）| 1管（10ng/mL）|

| 生物素标记检测抗体 | 1瓶（120μL） | 1瓶（60μL） |

| HRP标记链霉亲和素 | 1瓶（120μL） | 1瓶（60μL） |

| TMB显色液 | 1瓶（10mL） | 1瓶（5mL） |

| 终止液 | 1瓶（10mL） | 1瓶（5mL） |

| 洗涤液（20×） | 1瓶（30mL） | 1瓶（15mL） |

| 样本稀释液 | 1瓶（20mL） | 1瓶（10mL） |

样本要求

血清/血浆：采集后离心去除颗粒，-20℃保存，避免反复冻融。

唾液/细胞上清：离心去除沉淀，稀释后检测。

推荐稀释比例：1:5~1:10（具体需预实验优化）。

操作步骤

标准品稀释：用标准品稀释液配制系列浓度（0、0.5、1、2、5、10 ng/mL）。

加样：每孔加入标准品或样本100μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后，用洗涤液（1×）洗板3次。

加检测抗体：每孔加生物素抗体100μL，37℃孵育60分钟。

加酶结合物：每孔加HRP标记链霉亲和素100μL，37℃避光孵育30分钟。

显色：加入TMB 90μL，37℃避光反应15-20分钟。

终止：加入终止液50μL，立即测定OD450值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线（推荐四参数拟合）。

根据样本OD值从曲线中计算CST4浓度。

若样本稀释，需乘以稀释倍数。

性能参数

灵敏度：≤0.1 ng/mL

检测范围：0.2-10 ng/mL

精密度：板内CV<10%，板间CV<15%

特异性：与人CST1、CST3无交叉反应

注意事项

试剂使用前平衡至室温，避免反复冻融。

终止液为酸性溶液，避免接触皮肤。

显色时间过长可能导致背景过高。

本试剂盒仅限科研使用，不用于临床诊断。

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