产品名称 | 大鼠转铁蛋白(TF)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat TF ELISA Kit |
分类 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 | 62.5pg/mL-2000pg/mL |
灵敏度 | 31.25pg/mL | 货号 | PR33129 |
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃避光保存
用途:定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中转铁蛋白(TF)浓度。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA):
微孔板预包被大鼠TF特异性抗体,加入样本(标准品或待测样品)及HRP标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
洗涤去除未结合组分后,加入底物TMB显色,在过氧化物酶催化下产生蓝色产物,酸性终止液转化为黄色。
450 nm波长下测定吸光度(OD值),OD值与TF浓度呈正相关,通过标准曲线计算样本浓度。
样本处理要求

血清:全血室温静置2小时或4℃过夜后,1000×g离心20分钟,取上清检测(需使用无热原、无内毒素试管)。
血浆:推荐EDTA抗凝,采集后30分钟内1000×g离心15分钟,避免溶血或高血脂样本。
保存:分装后-20℃/-80℃保存,避免反复冻融;4℃保存需1周内检测,冻存样本建议6个月内检测。
高浓度样本:需预实验确定稀释倍数(建议使用样品稀释液)。
操作步骤

试剂准备:提前平衡至室温,混匀避免气泡。
加样:
空白孔:100 μL样品稀释液。
标准孔/样本孔:100 μL标准品或待测样本(避免触及孔壁)。
孵育:37℃反应120分钟,洗涤后加入HRP标记抗体。
显色:加入TMB底物,避光反应后终止,450 nm读值。
注意事项

实验需使用酶标仪(450 nm滤光片)、精密移液器及EP管。
标准曲线需每次实验重新制备。
避免交叉污染,不同步骤间彻底洗涤。
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