商品属性
产品名称
小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒
英文名称
Mouse IL-9 ELISA Kit
检测范围
31.25pg/mL-1000pg/mL
货号
PM33282
保存条件:2-8℃避光保存,试剂开封后需按标签要求分装保存
检测原理
采用双抗体夹心ELISA法。包被抗小鼠IL-9单克隆抗体的微孔板与样本中的IL-9结合,加入生物素标记的检测抗体后形成复合物,再与辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素结合。通过TMB底物显色,450nm波长测定吸光度(OD值),样本中IL-9浓度与OD值呈正相关,通过标准曲线计算浓度。
试剂盒组成
预包被酶标板(96孔/48孔)
IL-9标准品(冻干粉,通常为10ng/瓶)
生物素标记检测抗体
HRP标记链霉亲和素
样本稀释液(10×浓缩液)
洗涤缓冲液(20×浓缩液)
TMB底物溶液(A/B液)
终止液(2M硫酸)
样本要求
适用样本:小鼠血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物体液
样本处理:
血清/血浆:离心去除颗粒物,避免反复冻融
细胞上清:离心后取澄清液体
建议稀释比例根据预实验确定
操作步骤
标准品复溶:用稀释液配制系列浓度标准品(通常为0-1000pg/mL)。
加样:每孔加入标准品或样本100μL,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃液后使用1×洗涤缓冲液洗板3次。
加检测抗体:每孔加入生物素化抗体,37℃孵育60分钟。
加酶结合物:加入HRP标记链霉亲和素,37℃孵育30分钟。
显色:加入TMB底物避光反应15-20分钟。
终止:加入终止液后30分钟内测定OD值。
注意事项
试剂使用前需平衡至室温,避免反复冻融标准品。
不同批次试剂不可混用,未使用的板条需密封保存。
显色液需避光操作,终止后若溶液呈深黄色需稀释后重测。
实验需使用一次性耗材,避免交叉污染。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过四参数拟合方程计算样本浓度。
声明
本试剂盒仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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