商品属性
产品名称
小鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒
英文名称
Mouse TNF-β ELISA Kit
检测范围
31.25pg/mL-1000pg/mL
货号
PM33299
检测原理
采用双抗体夹心法。将纯化的小鼠TNF-β抗体包被于微孔板,形成固相抗体。样本中的TNF-β与固相抗体结合后,加入HRP标记的检测抗体形成复合物,经洗涤后加入TMB底物显色。显色强度与样本中TNF-β浓度呈正相关,通过450nm波长测定吸光度(OD值)定量分析。
适用范围
用于检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清等液体样本中的TNF-β含量。
试剂盒组成
预包被微孔板(96孔或48孔)
TNF-β标准品(浓度梯度)
酶标试剂(HRP标记抗体)
样本稀释液
TMB显色液
终止液
洗涤缓冲液(20×浓缩液)
封板膜、说明书及质检报告
保存条件
未开封试剂盒2-8℃保存,有效期12个月;开封后酶标板需密封防潮,标准品分装冻存(-20℃)。
操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释至工作浓度。
加样:每孔加入标准品或样本100μL,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃液后拍干,加洗涤液静置30秒,重复5次。
加酶标试剂:每孔加HRP标记抗体100μL,37℃孵育60分钟。
显色:洗涤后加TMB 90μL,避光反应15-30分钟。
终止:加终止液50μL,15分钟内测定OD450nm。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过回归方程计算样本浓度(需乘以稀释倍数)。
注意事项
避免反复冻融样本;
严格控制反应温度和时间;
显色后若出现沉淀,需离心后检测;
不同批次试剂不可混用。
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