兔白介素10(IL-10)ELISA试剂盒

商品属性

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将抗兔IL-10抗体包被于酶标板，样本中的IL-10与包被抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体形成复合物，再通过辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素与底物显色。显色强度与样本中IL-10浓度成正比，通过标准曲线计算含量。

适用范围

适用于兔血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物体液中的IL-10定量检测。

试剂盒组成

预包被酶标板：96孔（或48孔，根据配置）

标准品：冻干粉或液体，浓度范围通常为0-1000 pg/mL

生物素标记抗体：1瓶（12 mL）

HRP-链霉亲和素结合物：1瓶（12 mL）

洗涤缓冲液（20×浓缩液）：50 mL，需稀释后使用

底物溶液（TMB）：A液、B液各1瓶

终止液：1瓶（酸性溶液）

样本稀释液：1瓶（10×浓缩液）

操作步骤

样本准备：血清/血浆需离心去除颗粒物，细胞上清液直接检测或适当稀释。

标准品稀释：按说明书梯度稀释至工作浓度。

加样与孵育：

每孔加入标准品或样本100 μL，37℃孵育1-2小时。

洗涤后加入生物素标记抗体，孵育30-60分钟。

再次洗涤，加入HRP-链霉亲和素，孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB底物避光显色15分钟，终止后30分钟内测定OD450 nm值。

注意事项

储存条件：未开封试剂盒需2-8℃保存；开封后酶标板需密封防潮，其他组分按标签要求存放。

实验操作：

避免反复冻融标准品或样本。

加样时避免气泡，孵育时间需严格控制。

洗涤需彻底，防止非特异性结合。

安全提示：

TMB底物有毒性，需佩戴手套操作。

终止液为强酸，避免接触皮肤。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合（或对数回归）计算样本浓度。

技术参数

灵敏度：通常≤5 pg/mL

检测范围：15-1000 pg/mL

特异性：不与兔其他细胞因子交叉反应。

批内/批间变异系数：均<10%。

生产信息

保质期：6-12个月（详见外包装标签）。

用途限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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