预期用途
本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或其他生物液体中的SDF-1含量，适用于科研用途，不用于临床诊断。
产品名称 | 人基质细胞衍生因子1(SDF-1/CXCL12)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human SDF-1/CXCL12 ELISA Kit |
分类 | Human/人Elisa试剂盒 | 检测范围 | 0.3125ng/mL-10ng/mL |
灵敏度 | 0.15625ng/mL | 货号 | PH33182 |
实验原理
固相包被：微孔板预包被纯化SDF-1抗体。
反应步骤：依次加入样本或标准品、生物素化SDF-1抗体、HRP标记亲和素，经洗涤后以TMB显色。
显色机制：TMB在过氧化物酶催化下生成蓝色产物，酸化后转为黄色，颜色深度与SDF-1浓度正相关。
检测：450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。
试剂盒组成
酶标板：96孔（可拆卸）。
标准品（冻干粉）：2瓶（4,000 pg/ml初始浓度），临用前需以稀释液复溶并梯度稀释至31.2–2,000 pg/ml系列浓度。
其他组分：
生物素化抗体
HRP标记亲和素
TMB显色液
终止液
洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）
封板膜、密封袋
样本要求
类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清液等。
处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物，2–8℃短期保存（≤24小时），长期保存需≤-20℃。
操作步骤
标准品制备：复溶后稀释为7个浓度梯度。
加样：每孔加入样本或标准品100μL，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃液后加洗涤液洗板3次。
加生物素化抗体：100μL/孔，37℃孵育60分钟。
加酶结合物：100μL/孔，37℃避光反应30分钟。
显色：加TMB 90μL/孔，避光显色15–30分钟。
终止：加终止液50μL/孔，立即测定OD450nm。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，拟合回归方程。
样本浓度通过曲线方程计算，稀释样本需乘以稀释倍数。
性能参数
灵敏度：≤31.2 pg/ml。
精密度：批内变异系数（CV）<9%，批间CV<11%。
线性范围：31.2–2,000 pg/ml（具体范围可能因批次调整）。
保存与有效期
未开封试剂盒：2–8℃保存，有效期6个月。
开封后：酶标板需密封干燥保存，标准品及抗体建议分装冻存。
注意事项
避免试剂接触皮肤或黏膜，操作时佩戴防护用具。
不同批次试剂不可混用。
显色时间需严格控制，避免过度反应。
样本中不得添加NaN3，以免抑制酶活性。
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