产品名称 | 人趋化因子CCL3样蛋白1(CCL3L1)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human CCL3L1 ELISA Kit |
分类 | Human/人Elisa试剂盒 | 检测范围 | 0.3125ng/mL-10ng/mL |
灵敏度 | 0.15625ng/mL | 货号 | PH33193 |
检测方法：竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）
规格：96T/48T
检测范围：78.125–5000 pg/mL
最低检测限：32 pg/mL
适用样本：血清、血浆、组织匀浆、腹水、细胞培养上清
保存条件：2–8℃冷藏，避免光照或冷冻。
实验原理
试剂盒采用竞争法检测样本中CCL3L1含量。预包被抗体与样本中的CCL3L1及生物素标记抗原竞争结合，形成固相免疫复合物。洗涤后加入亲和素-HRP，催化TMB显色，450 nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与样本中CCL3L1浓度呈负相关。
操作步骤
试剂准备
所有试剂使用前需平衡至室温（20–25℃），避免反复冻融。
配制洗涤液：使用干净塑料容器，按说明书比例稀释浓缩洗涤液。
加样与孵育
标准品孔：加入50 μL系列浓度标准品（建议梯度稀释）。
样本孔：加入50 μL待测样本（血清/血浆需离心去除杂质）。
每孔加入50 μL生物素标记抗原，37℃孵育30分钟。
洗涤
弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后拍干，重复3次。
酶结合反应
每孔加入100 μL亲和素-HRP，37℃孵育30分钟，再次洗涤。
显色与终止
每孔加入90 μL TMB底物（避光操作），37℃避光显色15分钟。
加入50 μL终止液（2M硫酸），立即测定OD值（450 nm）。
注意事项
样本处理：避免溶血或反复冻融；组织样本需匀浆后离心取上清。
板条保存：未使用的板条需密封放回4℃保存，避免受潮。
加样精度：使用一次性吸头，避免交叉污染；加样时避免触碰孔壁。
显色控制：底物A需避免挥发，底物B需避光；终止后10分钟内完成读数。
质控要求：建议每板设置复孔及空白对照，CV值应≤15%。
结果计算
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。
性能参数
精密度：板内变异系数<10%，板间变异系数<12%。
回收率：85–115%（添加标准品验证）。
特异性：不与CCL3、CCL4等其他趋化因子交叉反应。
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