CY5-氯霉素/CY5-Chloramphenicol/Cy5-氯霉素(Cyanine5-Chloramphenicol)/CY5-CAP / CAP-CY5/近红外荧光标记广谱抗生素探针
组成单元:氯霉素为活性核心,是一种硝基苯类广谱抗生素,通过抑制细菌蛋白质合成(结合细菌核糖体 50S 亚基)发挥抗菌作用;CY5 为荧光标记基团,通过与氯霉素分子中的羟基(-OH)或氨基(-NH-)经活化后形成的共价键(如酯键、酰胺键)实现偶联,偶联位点严格选择不影响氯霉素抗菌活性中心(硝基、二氯乙酰胺基)的基团,确保活性保留;
物理状态:常规为深蓝色至蓝黑色粉末,易吸潮,科研级产品纯度通常≥95%(高效液相色谱 HPLC 检测),需同时保证荧光活性与抗菌活性(对大肠杆菌的最低抑菌浓度 MIC≤10 μg/mL)。
活性保留:优质的 CY5 - 氯霉素需保留氯霉素的广谱抗菌活性,其作用机制与天然氯霉素一致:特异性结合细菌核糖体 50S 亚基,抑制肽酰基转移酶活性,阻断肽链延长,从而抑制细菌蛋白质合成,对革兰氏阴性菌(如大肠杆菌、沙门氏菌)、革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌)及厌氧菌(如脆弱拟杆菌)均有抑制作用,对病毒、真菌无活性;
作用条件:抗菌活性最适 pH 为 6.0-7.0,最适温度为 30-37℃,低温环境(4-10℃)下活性可稳定保持(10℃储存 7 天活性下降≤5%),高温(>55℃)会导致分子结构破坏(60℃处理 1 小时活性丧失约 35%);金属离子(如 Fe³⁺、Cu²⁺)对其活性影响较小,但强还原剂(如 Na₂S₂O₃)会还原硝基基团,导致抗菌活性完全丧失;
溶解性:在纯水中溶解度较低(约 10-30 μg/mL),易溶于 N,N - 二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)等有机溶剂(溶解度可达 5-15 mg/mL),也可溶于含 0.05% Tween-80 的缓冲液(如 PBS,pH 7.4)中(溶解度约 80-150 μg/mL),溶解后需现配现用,长时间放置(>24 小时)易发生聚集,导致荧光淬灭与活性下降。
储存稳定性:粉末状 CY5 - 氯霉素在 - 20℃避光、密封、干燥条件下可稳定保存 18-24 个月;溶解后(浓度 50-100 μg/mL,含 0.05% Tween-80 的 PBS 或 DMSO)在 4℃避光条件下可保存 5-7 天,荧光活性与抗菌活性下降≤8%;反复冻融(≥3 次)会导致分子聚集,抗菌活性下降≥30%,荧光强度衰减≥25%;
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