结肠弯曲菌检测试剂盒
简介:
结肠弯曲菌(Campylobacter coli)是一种常见的食源性病原体,可引起人类细菌性胃肠炎。针对结肠弯曲菌的检测,PCR-荧光探针法因其高灵敏度和特异性而被广泛应用。
以下是结肠弯曲菌检测试剂盒的详细说明:
产品名称 | 结肠弯曲菌检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1269 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测原理
基于实时荧光定量PCR技术,利用特异性引物和荧光探针,针对结肠弯曲菌的保守基因区域(如16S rRNA基因、mapA基因等)设计,
通过DNA扩增和荧光信号实时监测,实现细菌核酸的定性或定量检测。
主要组成
PCR反应液:含缓冲液、dNTPs等,用于支持PCR扩增反应。
酶液:含高保真DNA聚合酶和荧光标记探针。
引物和探针:特异性结合结肠弯曲菌基因序列,探针携带荧光基团和淬灭基团,扩增时释放荧光信号。
阳性质控品:含已知浓度的结肠弯曲菌核酸,用于验证试剂盒灵敏度和反应有效性。
阴性质控品:不含结肠弯曲菌核酸,用于排除试剂污染或假阳性结果。
检测流程
样本采集:采集可疑食品、粪便或环境样本,确保样本新鲜或低温保存。
核酸提取:使用磁珠法或离心柱法提取样本中的总DNA,避免核酸降解或污染。
PCR反应:将提取的DNA、引物、探针和酶混合,在荧光定量PCR仪中进行扩增,实时监测荧光信号变化。
结果分析:根据Ct值(循环阈值)判断样本中是否含有结肠弯曲菌核酸,Ct值越低,细菌载量越高。
技术优势
高灵敏度:可检测低浓度细菌核酸,显著高于传统培养法。
高特异性:引物和探针针对结肠弯曲菌保守区域设计,避免与其他细菌交叉反应。
快速高效:全程检测时间约1.5-2小时,远快于传统培养法(需数天)。
定量分析:可通过标准曲线实现细菌载量的精确定量。
应用领域
食品安全检测:用于肉类、禽类、乳制品等食品中的结肠弯曲菌筛查,保障食品安全。
临床诊断:辅助诊断由结肠弯曲菌引起的细菌性胃肠炎。
环境监测:用于食品加工环境、水源等中的结肠弯曲菌监控。
科研实验:用于结肠弯曲菌的流行病学调查、毒力基因研究等。
注意事项
严格分区操作(样本处理区、试剂准备区、核酸扩增区),避免交叉污染。
所有试剂需在-20℃避光保存,避免反复冻融。
检测结果需结合样本来源和实际情况进行综合判断。
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