人永生化表皮细胞/角质形成细胞+LUC;hacat+LUC
产品信息:

人永生化表皮细胞/角质形成细胞+LUC(HaCaT+LUC)是一种经过基因改造的细胞系,源自正常成人皮肤的角质形成细胞,通过转染荧光素酶(Luciferase, LUC)基因,使其能够表达荧光素酶,从而用于生物发光成像和相关研究。以下是其详细说明、培养操作和特性:
产品名称 | 人永生化表皮细胞/角质形成细胞+LUC;hacat+LUC | 英文名称 | LUChacat+LUC:LUChacatLUC |
货号 | AXB10166 | 生长特性 | 贴壁生长 |
特性/操作 详细信息
细胞来源与特性 源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,经体外培养后自然转化为人永生化角质形成细胞(HaCaT),具有无限增殖能力,保留角质形成细胞分化特性,但不具有致瘤性。
通过基因工程手段转入荧光素酶(Luciferase, LUC)基因,可在特定底物(如荧光素)存在下发出生物荧光,用于实时监测细胞活性、基因表达或信号通路研究。
细胞呈上皮细胞样形态,贴壁生长,表达角蛋白等角质形成细胞标志物。
培养基 DMEM高糖培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素(PS)。
培养条件 37℃、5% CO、饱和湿度。
传代方法 细胞密度达80%-90%时进行传代。
用0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化1-3分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落即终止消化。
离心收集细胞,按1:2至1:4比例分瓶传代。
冻存与复苏 冻存液为90%FBS+10%DMSO,程序降温后液氮保存。
复苏时37℃水浴快速解冻,加入完全培养基稀释DMSO,离心后重悬接种。
应用领域 用于皮肤生物学、氧化应激、细胞增殖与凋亡等领域的机制研究。
通过荧光素酶报告系统,可用于基因表达调控、信号转导、药物筛选及细胞间相互作用等研究。
HaCaT+LUC细胞系因其永生化特性、荧光素酶报告系统和易于培养的特点,成为研究皮肤生物学和相关疾病机制的重要工具。在培养过程中,需注意维持适宜的培养条件和操作规范,以确保细胞的正常生长和荧光素酶活性。
基本操作步骤:

原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
培养操作要点:

基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
公司正在出售的产品:
Anti-GRP75 G蛋白偶联受体75抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | phospho-TSC1(Ser505) 英文名称: 0酸化性硬化症蛋白1抗体 0.1ml |
ICAM- I 小鼠细胞间粘附因子-ⅠMulti-class antibodies规格: 48T | LP Ab-IgA(Human Legionella antibody IgA) ELISA Kit 人军团菌抗体IgAMulti-class antibodies规格: 48T |
TNF-alpha 坏死因子-α抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | Anti-GLUT2 葡萄糖转运蛋白2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein) ELISA Kit 人特异性β1糖蛋白Multi-class antibodies规格: 48T | Anti-CD171/NCAM-L1/FITC 荧光素标记神经细胞粘附分子配体1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
G-CSF ELISA Kit 大鼠粒细胞集落刺激因子Multi-class antibodies规格: 48T | BrdU(Mouse Bromodeoxyuridine) ELISA Kit 小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶Multi-class antibodies规格: 48T |
Anti-CD20/Biotin 生物素化CD20抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | G-CSF ELISA Kit 大鼠粒细胞集落刺激因子Multi-class antibodies规格: 48T |
Phospho-TSC2(Ser664) 英文名称: 0酸化性硬化蛋白抗体 0.1ml | C6orf204 英文名称: 6号染色体开放阅读框204抗体 0.2ml |
Anti-TEM8/FITC 荧光素标记内皮标志物8抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh SERPINB10 丝氨酸蛋白酶抑制剂B10抗体 规格 0.2ml |
RBPJK 英文名称: Notch转录调控蛋白RBPJK抗体 0.2ml | 人永生化表皮细胞/角质形成细胞+LUC;hacat+LUC轴蛋白1Axin protein 1抗体 Anti-Axin1 0.1ml |
Rhesus antibody Rh VEGF 内皮生长因子抗体 规格 0.1ml | Anti-Phospho-Btk(Ser180) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠蛋白酪氨酸激酶ATK抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字: hacat+LUC;人永生化表皮细胞/角质形成细胞+LUC;贴壁细胞;
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