鸡淋巴瘤细胞DT40 是从鸡法氏囊B细胞淋巴瘤中分离得到的经典B淋巴细胞系,属于重要的淋巴瘤研究与免疫学模型。该细胞具有极高的基因同源重组效率,是研究基因修复、DNA损伤应答及免疫球蛋白基因重排机制的核心细胞系之一。DT40 在显微镜下表现为悬浮生长状态,细胞圆形或卵圆形,常形成细胞团块。由于其特殊的来源和基因特性,DT40 保留了鸡B细胞部分免疫功能,并在免疫信号转导和基因工程实验中表现出独特的优势。作为“基因修饰平台细胞”,鸡淋巴瘤细胞DT40 已成为分子生物学、肿瘤免疫学及DNA修复研究的“黄金模型”,在国际上应用十分广泛。
鸡淋巴瘤细胞DT40 在科研中的应用范围广阔,主要集中在以下几个方面:
DNA修复与基因编辑研究:DT40 细胞的基因同源重组效率远高于哺乳动物细胞,因此成为研究 DNA 双链断裂修复、碱基切除修复、非同源末端连接等机制的理想模型。
免疫球蛋白基因重排与抗体多样性研究:利用DT40 可研究免疫球蛋白基因的体细胞超突变、基因转换以及类切换重组过程。
淋巴瘤与免疫疾病机制探索:由于DT40来源于鸡B淋巴瘤,可用于研究淋巴瘤的发生机制及B细胞相关疾病的分子基础。
信号转导通路解析:常用于研究NF-κB、JAK/STAT、PI3K/Akt等信号通路在B细胞发育与功能中的作用。
基因功能验证平台:DT40 细胞便于基因敲除与敲入实验,因此广泛用于验证 DNA修复基因、肿瘤抑制基因及免疫调控基因的功能。
药物与抑制剂筛选:在DNA损伤应答相关药物、抗淋巴瘤药物以及免疫调节剂开发中,DT40 可作为可靠的细胞实验模型。
在使用鸡淋巴瘤细胞DT40时,常见的实验设计包括:
基因敲除与同源重组实验:利用 DT40 的高效同源重组能力,设计靶向载体敲除特定基因,观察 DNA修复和细胞周期调控变化。
DNA损伤应答实验:使用紫外照射、放射线或药物(如丝裂霉素C)诱导 DNA 损伤,检测 γ-H2AX、p53、CHK1 等关键分子的变化。
免疫球蛋白重排分析:通过PCR、测序或流式细胞术分析免疫球蛋白基因重组与多样性形成机制。
信号通路活性检测:采用 Western blot、qPCR 或荧光素酶报告基因系统检测 NF-κB、STAT3 等通路的激活情况。
药物敏感性实验:将 DT40 细胞处理不同药物或化合物,检测存活率、增殖及凋亡,评估潜在药物对B淋巴瘤的抑制作用。
鸡淋巴瘤细胞DT40 作为研究模型,具有以下显著优势:
极高的基因同源重组效率:相比哺乳动物细胞,DT40 的基因编辑效率更高,可快速实现敲除或敲入实验。
稳定的遗传背景:DT40 保持较稳定的基因组,便于进行长时间传代与重复实验。
适合大规模功能基因筛选:常用于系统性研究 DNA修复基因、免疫相关基因和信号通路分子。
代表性强:来源于B淋巴瘤,能够在一定程度上模拟淋巴瘤细胞的生物学行为。
实验操作简便:悬浮培养,易于传代和收集,适合多种分子与细胞学实验。
鸡淋巴瘤细胞DT40(Chicken lymphoma cells, DT40)不仅是研究 DNA 修复和基因重组的理想模型,也是国际公认的“高效基因编辑细胞系”。其在免疫学、分子肿瘤学、DNA修复机制研究中的应用价值不可替代。随着CRISPR-Cas9等基因编辑技术的发展,DT40 仍将是基因功能验证与药物靶点筛选的重要平台。未来,DT40 可进一步与单细胞组学、多组学分析相结合,拓展其在精确免疫学、肿瘤机制研究以及新型免疫治疗策略开发中的应用前景。作为一类具有独特研究优势的鸡淋巴瘤细胞系,DT40 将持续在基础科研与应用转化研究中发挥核心作用。
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