A375+EGFP人恶性黑色素瘤细胞+EGFP
英文名称 | A375+EGFP:A375EGFP | 规格 | 1×106 |
货号 | XG-X3227 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
细胞特性:
A375源自一位54岁女性，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在琼脂上形成克隆。
A375-EGFP是在 A375细胞上用慢病毒标记上EGFP，可以显示绿色荧光，带有嘌呤霉素抗性。
细胞特性
1） 来源：人黑色素瘤
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
1细胞背景与构建
基础细胞系：A375源于一名54岁女性恶性黑色素瘤患者的皮肤转移灶，具有高转移性和侵袭性。
EGFP标记：通过质粒转染或慢病毒载体将EGFP基因整合至A375基因组，实现稳定表达绿色荧光蛋白（激发光48nm，发射光50nm）。
应用优势：
实时追踪：活细胞成像中可视化肿瘤细胞迁移、侵袭及转移（Transwel实验）。
体内外模型：适用于小鼠异种移植模型（皮下/尾静脉注射），通过荧光显微镜或小动物成像系统（IVIS）监测肿瘤生长。
2培养条件与关键参数
培养基：DMEM（高葡萄糖10FB1双抗，需添筛选抗生素（如G418，浓度根据转染载体确定，通常100-50μg/mL）。
培养要点：
定期检测荧光强度，避免传代次数过多导致EGFP表达丢失。
建议每3-6个月进行单克隆筛选，维持高荧光纯度。
3实验应用方向
转移机制研究：
结合划痕实验、3D肿瘤球模型（Matrigel）观察EGFP标记细胞的动态侵袭过程。
药物筛选：
测试靶向药物（如BRAF抑制剂维莫非尼）对荧光标记细胞的凋亡/增殖影响（联用Hoechs33342/PI染色）。
免疫治疗：
与CAR-T细胞共培养，通过荧光强度变化评估肿瘤细胞杀伤效率。
注意事项：
污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。
霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。
支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。
操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。
未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。
运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。
常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。
公司出售的产品：
台桌清洁剂（饭桌、工作台、学生课桌椅等） | 突触相关蛋白23重组兔单克隆抗体 |
冰冻切片组织衰老特异性早期脂褐素苏丹黑原位染色试剂盒 | 肌动蛋白γ1抗体 |
化学发光法定量检测试剂盒 | PE-Cy5标记小鼠CD45R单克隆抗体 |
组织IRAK4激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 髓鞘蛋白P0样蛋白3抗体 |
HSV1（HERPES SIMPLX1）病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒 | E3泛素连接酶蛋白NEURL1B抗体 |
细胞免疫荧光显微镜基础检测试剂盒（无一抗和二抗） | 6号染色体开放阅读框182抗体 |
TNF BETA蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 磷脂酰基醇蛋白聚糖1抗体 |
细胞培养基乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 单羧酸转运蛋白13抗体 |
细胞CASPASE-2蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 | 血红蛋白δ抗体 |
食物总淀粉化学比色法定量检测试剂盒 | 快速周期调节蛋白SPDYE1抗体 |
电镜检测免疫化学固着溶液 | TRMT12蛋白抗体 |
细菌甲基红检测试剂盒 | 细胞周期基因1蛋白抗体 |
细胞EGFR激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | A375+EGFP人恶性黑色素瘤细胞+EGFPG蛋白偶联受体120抗体 |
血液过氧化氢酶（CATALASE）过氧化活性比色法定量检测试剂盒 | 人程序性死亡配体1单克隆抗体 |
通用型DNA损伤彗星检测完全试剂盒（荧光染色） | 钙调蛋白激酶激酶β抗体 |
石蜡切片神经纤维银染（Bodian）试剂盒 | 肿瘤/睾丸抗原家族104成员2抗体 |
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