人胚肾细胞转染ACE2293T/ACE2

1. 细胞性状

2. 细胞简介

人胚肾细胞ACE2-293T（ACE2‑293T，HEK293T‑ACE2）是在经典人胚肾细胞293T基础上，通过稳定导入人源ACE2受体而建立的工程化模型。人胚肾细胞ACE2-293T兼具人胚肾细胞（ren pei shen xibao）的高转染效率与ACE2受体高表达特征，适用于冠状病毒入侵与中和评估。作为升级版的人胚肾细胞293T，ACE2‑293T在形态上呈上皮样贴壁，增殖稳定、传代便捷，并在保持293T（HEK 293T）良好蛋白表达能力的同时，显著提高了对SARS‑CoV‑2刺突蛋白介导进入的敏感性。本细胞在病毒学、免疫学与药理学研究中被广泛采用，适合建立假病毒体系、检测中和抗体效价、评价受体结合域（RBD）突变体效应及小分子抑制剂活性。在人胚肾细胞ACE2‑293T的标准化使用场景下，可快速获得重复性强的数据，从而提升人胚肾细胞与293T相关实验的可靠性。

3. 科研与应用领域

人胚肾细胞ACE2‑293T（ACE2‑293T，293T‑ACE2）的主要科研与应用方向：

① 假病毒中和评估：基于人胚肾细胞293T背景构建的ACE2‑293T可用于SARS‑CoV‑2伪病毒感染模型，适配不同变异株刺突蛋白（如D614G、Omicron系），评估血清或单抗中和效价。

② 受体结合与进入机制：利用ACE2‑293T分析刺突蛋白与人胚肾细胞ACE2受体的结合亲和力，判定进入依赖性与辅因子需求，并与人胚肾细胞293T对照以解析ACE2贡献。

③ 小分子与多肽筛选：在ACE2‑293T上开展入侵抑制剂、高通量药物筛选与命中验证，适合候选药物的体外初筛与构效关系研究。

④ 疫苗与抗体研发：借助ACE2‑293T进行抗体滴度测定、逃逸突变体表型评估，用于比较不同免疫方案的免疫原性与交叉中和谱。

⑤ 蛋白表达与载体评估：延续293T高转染特性，ACE2‑293T可表达报告基因或膜蛋白，配合流式/荧光成像建立定量化进入读数。

4. 推荐实验方案

以下为人胚肾细胞ACE2‑293T（293T‑ACE2）的常用实验流程要点：

① 假病毒感染实验：在ACE2‑293T播种24小时后，用携带S蛋白的VSV或慢病毒体系感染；48–72小时读取荧光/荧光素酶信号，计算感染率与抑制率。以未转染ACE2的人胚肾细胞293T作阴性对照，突出ACE2依赖性。

② 中和抗体测定：受试血清或单抗与假病毒预孵育后感染ACE2‑293T；通过IC50/ID50表征中和能力，实现人胚肾细胞与ACE2‑293T两体系的可比评估。

③ 小分子抑制剂筛选：在ACE2‑293T上进行剂量‑反应曲线，联合细胞活力（CCK‑8）排除细胞毒性干扰；建议同步在293T背景细胞做特异性验证。

④ 进入通路验证：在人胚肾细胞ACE2‑293T中敲降TMPRSS2或使用内吞抑制剂，判定进入途径并解析不同S蛋白变体差异。

⑤ 数据规范化：采用相同播种密度、MOI与读取时间；记录人胚肾细胞293T与ACE2‑293T批次信息，确保跨批次可重复。

5. 技术与性能优势

与仅有人胚肾细胞293T相比，人胚肾细胞ACE2‑293T在受体水平提供更高的入侵敏感性，能够在低MOI、低病毒滴度条件下获得更高信噪比读数，从而降低成本并提升通量。ACE2‑293T保持293T（HEK 293T）的高转染效率与蛋白表达优势，便于快速构建报告系统并进行高通量筛选。对于需要精确评估RBD突变体效应、中和抗体谱或小分子抑制剂作用的人胚肾细胞研究者而言，ACE2‑293T显著提高了实验灵敏度、稳定性与再现性。依托标准化培养条件（37°C，5% CO₂）与统一冻存条件（90%FBS + 10%DMSO），ACE2‑293T在多中心协作、跨实验室验证与药物开发流程中表现出优秀的一致性，是人胚肾细胞与293T体系在病毒进入学领域的首选工具。

6. 结论与前景展望

人胚肾细胞ACE2‑293T（HEK293T‑ACE2）在病毒进入、疫苗与抗体评价、小分子筛选等方向展现出突出性能，兼具人胚肾细胞293T的易用性与ACE2受体高表达带来的敏感性优势。随着新发变异株不断出现，ACE2‑293T将继续作为标准化假病毒平台核心细胞，用于人胚肾细胞相关实验的快速验证与对比。未来，结合CRISPR编辑、单细胞组学与高内涵成像，ACE2‑293T可进一步拓展至多受体/辅因子共表达模型，以系统解析进入途径差异，并服务于更广泛的病原体‑宿主互作研究与转化应用。