细胞属性：
产品名称 | LOVO+LUC人结直肠癌细胞荧光素酶标记 | 英文名称 | LOVO+LUC:LOVOLUC |
编号 | XG-X3408 | 规格 | 1×106 |
组织来源 | 结直肠腺癌 | 形态 | 贴壁生长 上皮细胞样 |
细胞特性：
该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
1） 来源：结直肠腺癌
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用。
1. 实验流程概述
1.1 选择荧光素酶基因
常用荧光素酶类型：
萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase, FLuc）：底物为D-荧光素，发射波长~560 nm，适合高灵敏度检测。
海肾荧光素酶（Renilla Luciferase, RLuc）：底物为腔肠素，可与FLuc双标记区分不同细胞群。
1.2 构建表达载体
载体类型：慢病毒（Lentivirus）、逆转录病毒（Retrovirus）或质粒（需转染效率高）。
常用启动子：CMV（强启动子）或EF1α（稳定表达）。
标签融合：可加嘌呤霉素（Puromycin）或新霉素（Neomycin）抗性基因用于筛选。
1.3 转染/感染细胞
慢病毒转导（推荐）：
包装慢病毒（含Luc基因）。
感染LOVO/LUC细胞（MOI需预实验确定）。
加入聚凝胺（Polybrene）增强感染效率（终浓度4-8 μg/mL）。
电转/脂质体转染：适合瞬时表达，但稳定转染需药物筛选。
1.4 筛选稳定细胞系
药物筛选（如嘌呤霉素，通常1-10 μg/mL，持续7-14天）。
单克隆化：通过有限稀释法挑选高表达克隆。
1.5 验证标记效果
体外检测：加入底物（如D-荧光素，150 μg/mL），用化学发光仪检测信号强度。
体内验证：将细胞移植至小鼠（皮下/原位），注射底物后观察生物发光信号（IVIS成像系统）。
2. 关键注意事项
细胞状态：确保LOVO/LUC细胞传代稳定，感染前24小时铺板至50%-70%密度。
荧光素酶活性优化：
避免反复冻融细胞（酶活性可能下降）。
体内实验时，D-荧光素注射剂量通常为100-150 mg/kg（腹腔注射），10-15分钟后成像。
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关键字： LOVO+LUC;人结直肠癌细胞荧光素酶标;LOVO+LUC:LOVOLUC;
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