LS180人结直肠癌细胞
英文名称 | LS180:LS180 | 规格 | 1×106 |
货号 | XG-X3411 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
细胞特性:
LS 180是从患有Dukes型结肠腺癌的58岁女性高加索人结肠直肠腺癌的患者的结肠中分离的贴壁细胞系。LS174T (ECACC目录号87060401)来自同一名患者。
1） 来源：人，女性，结肠癌
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用。
1. LS180细胞基础特性
来源：源自50岁男性结直肠腺癌患者的原位肿瘤。
关键特征：
上皮细胞样，贴壁生长，可形成腺样结构。
表达肠道特异性标志物（如MUC2、CEA）。
对5-氟尿嘧啶（5-FU）等化疗药物敏感。
培养条件：
培养基：EMEM或DMEM + 10% FBS + 1% NEAA（非必需氨基酸）。
传代比例：1:3至1:5（80%汇合时，胰酶消化2-3分钟）。
冻存液：90% FBS + 10% DMSO。
2. 荧光素酶标记（以慢病毒转导为例）
2.1 实验步骤
预实验：
测定LS180的慢病毒转导效率（建议使用MOI=5-20，梯度测试）。
优化Polybrene浓度（通常2-8 μg/mL）。
病毒转导：
细胞铺板：感染前24小时接种5×10^4细胞/孔（6孔板）。
加入慢病毒（含FLuc-PuroR基因）和Polybrene，孵育24小时后换液。
稳定筛选：
转导48小时后加入嘌呤霉素（1-3 μg/mL，剂量需预试），持续7-10天。
单克隆筛选：有限稀释法获得高表达克隆。
验证：
体外：检测荧光素酶活性（D-荧光素底物，IVIS成像）。
体内：皮下接种1×10^6 LS180-Luc细胞至裸鼠，监测肿瘤发光信号。
注意事项：
污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。
霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。
支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。
操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。
未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。
运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。
常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。
公司出售的产品：
721型分光光度仪1毫升1厘米光径塑料比色皿 | AF555标记的血管内皮细胞生长因子受体3抗体 |
酵母DNA损伤彗星荧光检测试剂盒 | 肌微管素相关蛋白6抗体 |
组织氧化型甘肽（GSSG）浓度荧光定量检测试剂盒 | PE标记人CD127 (IL7R)单克隆抗体 |
细胞CSF1R激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 糖基转移酶28家族1抗体 |
肠出血性大肠埃希菌（Enterohaemorrhagic E. coli）鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 | EPB41L4A蛋白抗体 |
超强免疫化学封闭溶液 | 9号染色体开放阅读框40抗体 |
BCL2蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 慢性粒细胞白血病33抗体 |
血液维生素B1高效液相色谱法定量检测试剂盒 | 蛋白酪氨酸磷酸酶PTPLB抗体 |
载玻片细胞NF KAPPA B P50蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 眼睛和头发颜色相关蛋白FUZ抗体 |
果菜谷比色法定量检测试剂盒 | 利什曼原虫表面蛋白酶(GP63)抗体 |
组蛋白H4-K8乙酰化检测试剂盒 | X染色体开放阅读框32抗体 |
细胞HSV（HERPES SIMPLX）病毒定性检测试剂盒 | 线粒体核糖体蛋白L21抗体 |
细胞MAPKAP KINASE3激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | LS180人结直肠癌细胞G蛋白通路抑制物蛋白2抗体 |
细胞单胺氧化酶A型（MAO－A）活性比色法定量检测试剂盒 | 溶质载体家族25成员18抗体 |
BrdU标记法组织冰冻切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒 | 肝素辅助因子II抗体 |
5 倍 MOPS分子生物级浓缩缓冲溶液 | 周期素D2抗体 |
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