LX-2+GFP人肝星形细胞+GFP
英文名称 | LX-2+GFP:LX2GFP | 规格 | 1×106 |
货号 | XG-X3414 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
细胞特性:
该细胞系由发表该细胞文章的第一作者命名，这个细胞又叫Lieming Xu-2，这是一个永生化的细胞。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。
1） 来源：肝
2） 形态：星状细胞，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用。
细胞特性:
1. LX-2细胞基础特性
来源：永生化人肝星形细胞系，源自正常肝组织，可模拟纤维化中的活化状态。
关键特征：
静息态：储存维生素A（自发荧光需注意），表达GFAP、desmin。
活化态：α-SMA高表达，分泌胶原（I/III型），参与纤维化。
培养条件：
培养基：DMEM（高糖） + 2% FBS（静息态）或 10% FBS（活化态）。
传代：0.25%胰酶消化（2-3分钟，避免过度活化）。
GFP标记方案（以慢病毒转导为例）:
2.1 实验流程
预实验优化：
测试LX-2对慢病毒的敏感性（MOI范围通常为10-50）。
评估Polybrene毒性（建议2-5 μg/mL）。
病毒转导：
细胞铺板：接种3×10^4细胞/孔（24孔板），24小时后加入GFP慢病毒（如pLenti-CMV-GFP-Puro）。
孵育：37℃ 12-24小时，换液去除病毒。
稳定株筛选：
嘌呤霉素筛选（0.5-2 μg/mL，7-10天），根据细胞状态调整浓度。
流式分选（FACS）：收集GFP高表达群体。
验证：
荧光显微镜：观察GFP均匀性和亮度。
Western Blot：检测GFP表达（27 kDa）。
功能验证：确保活化标志物（如α-SMA）未受转导影响。
2.2 注意事项:
自发荧光干扰：
LX-2静息态含维生素A脂滴（激发~330 nm，发射~540 nm），可能干扰GFP检测（激发~488 nm，发射~510 nm）。解决方法：
使用窄带滤光片。
提前用无血清培养基培养48小时减少脂滴。
活化状态控制：
GFP标记可能轻微激活LX-2，需设置未转导对照组，比较α-SMA表达。
注意事项：
污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。
霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。
支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。
操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。
未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。
运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。
常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。
公司出售的产品：
Rac1鸟苷酸酶活性分析试剂盒 | 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β2单克隆抗体 |
PROPIDIUM IODIDE简易细胞核形态染色试剂盒 | 肌球蛋白轻链激酶抗体 |
细胞脊髓过氧化酶（MPO）活性比色法定量检测试剂盒 | PerCP-Cy5.5标记人CD69单克隆抗体 |
细胞RSK1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 碳酸酐酶相关蛋白8抗体 |
苯乙醇（PEA）革兰氏阳性细菌选择琼脂平板 | ELMO3蛋白抗体 |
活体细胞半胱-4（CASPASE-4）活性原位荧光染色检测试剂盒 | 8号染色体开放阅读框K29抗体 |
石蜡切片组织CASPASE-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 螺旋环螺旋蛋白2抗体 |
肉类尿素比色法定量检测试剂盒 | 蛋白激酶C亚型G抗体 |
冰冻切片组织TNF ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 烟碱型乙酰胆碱受体α9/AChRα9抗体 |
蛋类羟丁酸比色法定量检测试剂盒 | 类泛素蛋白1抗体 |
冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB基础检测试剂盒（无一抗和二抗） | WDR91蛋白抗体 |
细菌抗生素（庆大）敏感性DISC弥散（KIRBY-BAUER）检测试剂盒 | 线粒体RNA聚合酶抗体 |
组织PHKG2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | LX-2+GFP人肝星形细胞+GFPG蛋白偶联受体GPR37样蛋白1抗体 |
尿液一氧化氮合成酶总活性荧光定量检测试剂盒 | 溶质载体蛋白家族21成员2抗体 |
石蜡切片组织衰老特异性早期脂褐素油性红原位间接染色试剂盒 | 甘油二酯酰基转移酶2抗体 |
微型RNA（miRNA）文库构建技术试剂盒 | 肿瘤抑制基因p63α抗体 |
关键字： LX-2+GFP;人肝星形细胞+GFP;LX-2+GFP:LX2GFP;
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