MHCC-97L人高转移性肝癌细胞

细胞属性

细胞特性

该细胞来源于中山医院，生长较缓慢。

1） 来源：肝癌

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1. 细胞基础特性与培养体系

核心特征：

转移特性：肺转移率100%（裸鼠尾静脉注射）

分子标志：

上皮-间质转化(EMT)表型：E-cadherin↓/Vimentin↑

高表达MMP9、Twist等转移相关基因

基因组特征：保留HBV整合片段（可研究病毒致癌）

优化培养条件：

基础培养基：DMEM高糖 + 10% FBS（推荐HyClone批次）

特殊添加：

  - 1% Sodium Pyruvate（增强糖代谢）

  - 1% NEAA（支持快速增殖）

传代方法：0.25%胰酶+0.02% EDTA消化2-3分钟（观察细胞变圆立即终止）

冻存配方：90% FBS + 10% DMSO（程序降温：-1℃/min）

关键注意事项：

需使用TC处理培养瓶（增强贴壁）

维持密度在3-8×10 cells/mL（过高诱导自发EMT）

每3个月验证转移能力（Transwell实验）

2. 高转移研究关键技术

2.1 荧光素酶标记（肺转移示踪）

1. 慢病毒转导：pLVX-EF1α-FLuc-Puro（MOI=20） 

2. 筛选：2μg/mL嘌呤霉素（10天）

3. 验证：体外检测发光值>1×10 photons/sec（IVIS成像）

2.2 循环肿瘤细胞(CTC)模型

1. 细胞准备：血清饥饿12h同步化

2. 注射：1×10 cells/200μL PBS（27G针头）

3. 监测：每周生物发光成像（曝光60s）

4. 终点：肺组织HE染色计数转移灶

3. 核心应用方案

3.1 转移机制研究

Transwell侵袭实验：

基质胶浓度：30% Matrigel

诱导剂：10% FBS + 20ng/mL HGF

定量：ImageJ分析穿膜细胞数（≥3随机视野）

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