OKT 3 小鼠杂交瘤细胞抗CD3 新品

1. 细胞性状

2. 细胞简介

OKT-3 小鼠杂交瘤细胞（OKT3、抗CD3、anti‑CD3）为经典的抗体分泌型杂交瘤细胞系，由免疫人T细胞抗原的BALB/c小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合而成，能够稳定分泌针对人CD3ε链的单克隆抗体。该抗体（OKT-3、抗CD3、anti‑CD3）属于IgG2a, κ同种型，可高亲和力结合TCR‑CD3复合物并触发T细胞活化信号，因此被广泛用作T细胞活化、扩增与功能检测的阳性刺激工具。OKT-3 小鼠杂交瘤细胞贴壁能力弱、以悬浮形式生长，在标准条件下具有良好的遗传与分泌稳定性，抗体滴度可通过补饲与密度控制进一步提升。作为可规模化生产抗CD3（OKT3、anti‑CD3）抗体的来源细胞，OKT-3 在免疫学、流式抗体制备、T细胞治疗前沿研究与质量控制中均占据核心地位。

3. 科研与应用领域

• 抗体制备与纯化：利用 OKT-3（OKT3、抗CD3、anti‑CD3）在腹水或生物反应器中表达，经Protein A/G层析获得高纯度抗体，用于流式分选、免疫印迹与功能阻断实验。
• T细胞激活与扩增：OKT-3（抗CD3）包被板或与抗CD28联用，诱导外周血T细胞强力活化，适用于CAR‑T、TCR‑T制备流程的体外扩增步骤。
• 免疫突触与信号转导：以 OKT3/anti‑CD3 交联TCR，研究ZAP‑70、LAT、NF‑κB等下游通路，评价小分子或生物制剂对TCR信号的调控作用。
• 诊断与质控：将 OKT-3（抗CD3、anti‑CD3）作为标准抗体用于检测试剂盒开发与批间一致性评估。
• 临床前模型：在人源化小鼠中用 OKT3/抗CD3 诱导T细胞活化，考察免疫相关不良反应机制与干预策略。

4. 推荐实验方案

• 抗体产量优化：以分批补料方式维持细胞密度（2–8×10^5/mL），定期检测上清抗CD3（OKT-3、OKT3、anti‑CD3）效价，比较不同补饲配方对抗体滴度与糖基化的影响。
• 板面包被激活：以10 µg/mL OKT-3（抗CD3、anti‑CD3）包被96孔板，外周血单个核细胞共培养48–72 h，通过CD69/CD25表达与IL‑2分泌评估激活强度；与抗CD28或IL‑2协同对照。
• 交联刺激模型：使用二抗交联 OKT3/抗CD3，快速诱导TCR信号，在5–30 min内收集细胞进行ZAP‑70、p‑ERK、p‑AKT的时间程曲线分析。
• Affinity/功能测定：采用ELISA与表面等离子共振（SPR）评价OKT‑3（anti‑CD3）亲和力；以Jurkat或原代T细胞功能读出（Ca2+流、NFAT‑luc）作为活性判定。
• 纯化与质控：Protein A洗脱后，对OKT‑3（抗CD3）进行低pH病毒灭活、SEC‑HPLC聚集度、内毒素与残留蛋白A检测。

5. 技术与性能优势

OKT-3 小鼠杂交瘤细胞在稳定性、产量与适配性方面具有显著优势。首先，OKT3（抗CD3、anti‑CD3）分泌稳定，同批次波动小，便于建立可重复的T细胞激活模型；其次，杂交瘤底盘对工艺变化较为耐受，易于在摇瓶与生物反应器间迁移，满足从研究级到中试级规模化需求。与可变性更高的原代抗体来源相比，OKT‑3（抗CD3、anti‑CD3）在同种型、亲和力与功能上更可控，有利于试剂批次一致性与法规合规。再次，OKT‑3 抗CD3抗体对TCR复合物具有高效跨联能力，能在低剂量条件下诱导强信号，降低实验成本并减少非特异效应。综合来看，OKT-3（OKT3、anti‑CD3、抗CD3）兼具高活性与易制造的优势。

6. 结论与前景展望

作为抗CD3单克隆抗体的经典来源，OKT-3 小鼠杂交瘤细胞（OKT3、anti‑CD3）在T细胞激活、CAR‑T上游制备、免疫信号研究与体外诊断等方向持续发挥作用。随着细胞治疗与双特异抗体技术的发展，以 OKT‑3（抗CD3、anti‑CD3）为基础的配方与工艺仍将被不断优化，例如低内毒素连续流纯化、温和交联策略与Fc工程改造等。未来，OKT-3 的标准化与高一致性将进一步降低免疫研究门槛，并支持更多可转化应用场景。综上，OKT‑3（OKT3、抗CD3、anti‑CD3）将继续作为免疫学与生物制剂研发中的关键底层工具细胞。