小鼠抗体亚型主要有以下几类:IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgM、IgA,其中前三种亚型抗体最多。不同亚型抗体在抗体结构(例如Fc区结构、是否以多聚体形式存在等)及功能上(例如补体激活、半衰期等)有所区别,进行抗体亚型鉴定能够更加清楚的了解手中抗体的结构及功能,从而更好的应用于下游实验。
德泰生物小鼠IgG抗体亚型鉴定试剂盒利用侧向层析免疫检测技术,可快速检测小鼠IgG抗体产物亚型。检测时,仅需吸取少量样品加至试纸卡加样区,等待10分钟,即可读取检验结果。
使用场景
检测细胞培养上清、腹水或纯化后的小鼠IgG抗体产物亚型(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3)。
检验方法
1.样本稀释:
1)细胞培养上清:1∶50(样本∶稀释液),即2μL样本加入100μL稀释液;
2)腹水:1∶1000(样本∶稀释液),即2μL样本加入2mL稀释液;
3)纯化后抗体:用稀释液稀释至500ng/mL;
4)如果样本中抗体浓度低于1μg/mL,则样本不用稀释,可直接加样检测;
*以上为推荐的样本稀释方法,对于首次测试,可参照执行,亦可根据样本浓度进行适当调整。
2.取出试纸条,平放在桌面上,平衡至室温;
3.吸取80μL样品添加至试剂卡加样区,加样时注意不要产生明显气泡,计时器记时,10分钟判读结果。
检验结果判定
1.阴性结果:质控线(C线)出现红色条带,检测线(T1/T2/T3/T4/T5)不出现红色条带;
2.阳性结果:质控线(C线)和检测线(T1/T2/T3/T4/T5其中1条或多条)均出现红色条带;
3.无效结果:质控线(C线)不出现红色条带,此时需重新检测。
试剂盒使用常见问题
Q: 鼠IgG抗体亚型鉴定试剂盒用免疫试纸条检测有什么优势?
A: 目前对单克隆抗体亚型的测定主要依赖ELISA检测,每次测定时间需要4h-6h,费时费力,严重滞缓了单克隆抗体纯化方法的选择和保存,增加了单克隆抗体制备过程中的时间和工作量。本产品是一种鼠源单克隆抗体亚型快速测定免疫试纸条的方法,能够便捷、快速对细胞上清中单克隆抗体或纯化后的单克隆抗体的亚型进行鉴定,且测定成本低,符合率高,重复性好,检测时间短,解决上述ELISA检测存在的问题。
Q: 使用鼠IgG抗体亚型鉴定试剂盒测试前,对样本有什么要求?
A: 测试前,冷藏的样本须恢复至室温,冷冻的样本须完全融化后,混匀,恢复至室温后再检测,如果样品出现明显浑浊,请离心后取上清检测。
Q: 鼠IgG抗体亚型鉴定试剂盒储存条件及其使用有什么需要注意的?
A: 在4~30℃条件下保存,有效期为12个月,避免阳光直晒,阴凉处保存,不可冷冻保存。
Q: 使用鼠IgG抗体亚型鉴定试剂盒时,是否需要设置对照组?
A: 为了确保实验结果的准确性,建议设置阴性对照与阳性对照。
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