人孕酮(progesterone)elisa试剂盒

                                             人孕酮(progesterone)elisa试剂盒
1. 检测原理（竞争性ELISA）

预包被微孔板：孔内包被孕酮类似物（或抗孕酮抗体）。

竞争结合：样本中的孕酮与HRP（辣根过氧化物酶）标记的孕酮（或抗体）竞争结合有限的抗体（或包被抗原）。

显色反应：加入TMB（四甲基联苯胺）底物后，酶催化反应产生蓝色，终止后变黄色。

吸光度检测：450nm波长测定OD值，孕酮浓度与颜色深浅成反比，通过标准曲线计算浓度。

 2. 主要组成

预包被微孔板（96孔，可拆卸）

孕酮标准品（0、0.5、1、2.5、5、10、20、50 ng/mL）

酶标结合物（HRP标记的孕酮或抗体）

显色底物（TMB）

终止液（1M HCl或H?SO?）

洗涤缓冲液（PBS-Tween 20）

样本稀释液（适用于高浓度样本）

3. 适用样本类型

血清（推荐无溶血、无脂血样本）

血浆（EDTA或肝素抗凝）

唾液（需离心去除杂质）

尿液（需调整pH，避免干扰）

组织匀浆（需裂解离心取上清）

样本稳定性：

短期（24h）：2-8℃

长期：-20℃或-80℃（避免反复冻融）

4. 操作步骤（简化版）

加样：标准品/样本 + 酶标结合物 → 37℃孵育1h。

洗涤：洗板5次，去除未结合物。

显色：加TMB → 避光反应15min（蓝色）。

终止：加终止液 → 变黄色。

检测：450nm测OD值（参考630nm）。

5. 技术参数

参数  说明

检测范围  0.1–50 ng/mL（可扩展稀释）

灵敏度  0.05–0.1 ng/mL（低检出限）

精密度  板内CV <10%，板间CV <15%

特异性  与17α-羟孕酮、皮质醇等交叉反应低

回收率  85–115%（验证样本处理效果）

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