人超氧化物歧化酶SOD1(SOD1)elisa试剂盒

1. 概述

超氧化物歧化酶1（Superoxide Dismutase 1, SOD1）是细胞内重要的抗氧化酶（分子量32kDa），特异性催化超氧阴离子（O??）转化为H?O?和O?。作为ALS（肌萎缩侧索硬化症）的关键致病蛋白，其检测对神经退行性疾病研究、氧化应激评估及抗氧化治疗监测具有重要意义。

2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高特异性）：

预包被抗SOD1单抗（克隆2A8）捕获样本中的SOD1

生物素标记检测抗体（克隆1C3）识别不同表位

链霉亲和素-HRP催化超敏化学发光底物

发光强度（RLU）与SOD1浓度正相关

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃（含干燥剂）  特殊处理板

SOD1标准品  0.5-100 ng/mL  -20℃  重组人SOD1（NIBSC标准）

生物素化抗体  100 μL  -20℃（避光）  无载体蛋白

SA-HRP  100 μL  2-8℃  RZ>3.2

化学发光底物  10 mL  2-8℃（避光）  动态范围10?

细胞裂解液  10 mL  -20℃  含蛋白酶抑制剂

抗氧化保护剂  5 mL  -20℃  防酶活性降解

 4. 样本要求

适用样本：

血清/血浆（肝素抗凝）

脑脊液（需10000g离心10min）

神经组织匀浆（脑/脊髓）

红细胞裂解液（1:10稀释）

特殊处理：

避免使用EDTA抗凝（螯合Cu2?影响SOD1结构）

样本采集后立即加入抗氧化保护剂

稳定性：

4℃保存≤24h（需避光）

-80℃可保存3个月（分装冻存）

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

冻干标准品用0.5mL PBS复溶

7点梯度稀释（0.5、1、5、10、25、50、100 ng/mL）

关键步骤：

加样体积：25μL样本+75μL稀释液

一抗孵育：4℃过夜（提高灵敏度）

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