1. 概述
转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1, TGF-β1)是多功能细胞因子(分子量25kDa),以前体形式分泌,经蛋白酶激活后发挥生物学作用。作为纤维化、肿瘤免疫调控和胚胎发育的关键介质,其检测对器官纤维化、癌症预后评估及免疫调节研究具有重要意义。
产品名称 | 人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa试剂盒 | 英文名称 | TGF-β1 Elisa Kit |
规格 | 48T\96T | 货号 | XG-EH0384 |
种属 | 人 | 用途 | 仅供科研实验 |
2. 检测原理
双抗体夹心ELISA(活性/潜在型可选):
预包被抗LAP抗体(克隆27235)捕获潜在型TGF-β1
酸激活(pH3.0处理)后检测总TGF-β1
生物素化抗active TGF-β1抗体(克隆9016)识别活性形式
链霉亲和素-HRP系统信号放大(化学发光/比色法可选)
3. 试剂盒组成
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T(可拆) 2-8℃ 特殊亲水处理
TGF-β1标准品 4-500 pg/mL -20℃ 含重组人TGF-β1活性蛋白
酸激活试剂 10 mL 室温 pH3.0甘氨酸-HCl缓冲液
中和缓冲液 10 mL 室温 pH7.4 PBS
生物素化抗体 120 μL -20℃(避光) 识别活性表位
化学发光底物 12 mL 2-8℃(避光) 动态范围10?
4. 样本要求
适用样本:
血清/血浆(EDTA抗凝,避免肝素)
组织裂解液(含1% Triton X-100)
细胞培养上清(无血清培养基)
支气管肺泡灌洗液(BALF)
特殊处理:
检测活性TGF-β1:直接检测(无需激活)
检测总TGF-β1:酸激活(pH3.0,10min)+中和
血小板去除(3000g×15min,防血小板释放干扰)
5. 实验流程优化
标准曲线建立:
冻干标准品用0.5mL 4mM HCl+0.1% BSA复溶
8点梯度稀释(4、8、16、31、63、125、250、500 pg/mL)
关键步骤:
酸激活:样本与激活试剂1:1混合,室温10min
中和:加入等体积中和缓冲液
检测限:化学发光法达0.5 pg/mL(比色法2 pg/mL)
质控要求:
每板包含:
非激活对照(检测内源性活性TGF-β1)
酸激活对照(检测总TGF-β1)
健康人血清质控(活性型:5-30 pg/mL;总TGF-β1:2-10 ng/mL)
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