人趋化因子CCL18(CCL18)elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术
捕获抗体:微孔板预包被抗CCL18单抗(如小鼠IgG1),靶向CCL18的N端表位(检测范围8–500 pg/mL)。
信号放大:生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统,搭配超敏TMB显色(灵敏度达2 pg/mL)。
抗干扰设计:含CC类趋化因子阻断剂(如CCL2/CCL3阻断肽),交叉反应率<0.5%。
动态范围优化
覆盖生理水平(健康人血清10–50 pg/mL)至病理浓度(如特发性肺纤维化患者BALF中>200 pg/mL)。
二、核心组分与样本要求

组分 技术参数
预包被96孔板 抗CCL18单抗固定化(批间差<7%,可拆分使用)
标准品 重组人CCL18(0、8、32、125、250、500 pg/mL,冻干粉含0.1% HSA稳定剂)
适用样本 血清(首选)、血浆(肝素抗凝)、支气管肺泡灌洗液(BALF,需离心澄清)
特殊添加剂 含0.05% Proclin 300防腐剂,2–8℃保存有效期18个月
三、临床应用与科研价值

纤维化疾病诊断
肺纤维化:BALF中CCL18>150 pg/mL提示疾病活动度(敏感性82%,特异性91%)。
肝纤维化:与肝星状细胞激活相关,联合TIMP-1检测可提高诊断准确性。
肿瘤微环境研究
乳腺癌、卵巢癌组织中CCL18通过CCR8受体招募调节性T细胞(Treg),促进免疫逃逸。
自身免疫病监测
类风湿关节炎滑液中CCL18水平与关节破坏评分正相关。
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四、操作规范与质控要点

样本处理
BALF样本需加入蛋白酶抑制剂(如1 mM PMSF),避免反复冻融。
血清/血浆采集后2小时内离心(4℃,1000×g,10分钟)。
实验关键
温育条件:37℃避光1小时,洗涤液需含0.05% Tween-20(pH 7.4)。
质控标准
每板需含:标准曲线(R2≥0.99)、高/低值质控(CV<10%)。
五、性能比较与注意事项
特性 优势 局限性
灵敏度 可检测CCL18单体及寡聚体形式 无法区分CCL18不同糖基化修饰亚型
特异性 与CCL3/CCL5交叉反应<0.3% 高脂血样本需超速离心(>5000×g)
通量 适配全自动平台 组织样本需优化裂解缓冲液
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