概述
人心肌肌钙蛋白T（Cardiac Troponin T，cTnT）是心肌细胞损伤的高度特异性标志物，在急性心肌梗死（AMI）诊断和心血管风险评估中具有关键临床价值。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，专用于定量检测人血清或血浆中的cTnT蛋白，满足心血管急症的实验室诊断需求。
1. 检测原理（双抗体夹心ELISA）
预包被捕获抗体：微孔板包被抗人cTnT单抗（靶向稳定表位：aa 136-147）。
样本结合：cTnT-肌钙蛋白复合物与捕获抗体特异性结合。
检测抗体孵育：加入HRP标记的抗cTnT二抗（靶向aa 125-131）。
信号放大与显色：TMB底物经HRP催化显色（蓝色→黄色）。
定量分析：450nm测OD值，浓度与吸光度成正比。
2. 试剂盒核心组分
组分 规格说明 保存条件
预包被微孔板 96孔（8×12），包被单抗M11-7 2-8℃干燥保存
cTnT校准品 重组cTnT（0、0.05、0.1、0.5、1、5、10 ng/mL） -20℃（冻干品）
HRP标记检测抗体 克隆M7-1，工作浓度1:1000 -20℃（含甘油）
TMB显色液 含稳定剂的即用型溶液 2-8℃避光
终止液 0.5M H?SO? 室温
3. 样本要求与处理
血清（推荐）：静置凝固后离心（1500×g，10min），避免纤维蛋白残留。
血浆（肝素锂抗凝）：采集后立即离心（1000×g，15min）。
稳定性：
室温：≤2小时
2-8℃：≤24小时
-70℃：≤2年（避免反复冻融）
4. 标准化操作流程
加样：100μL标准品/样本→37℃孵育60分钟
洗涤：自动洗板5次（300μL/孔洗涤液）
加酶标抗体：100μL/孔→37℃孵育30分钟
显色：加TMB（100μL/孔）→室温避光15分钟
终止读数：50μL终止液→立即450/630nm双波长检测
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5. 关键性能参数
参数 性能指标 临床意义
检测范围 0.01-25 ng/mL 覆盖AMI全程变化
分析灵敏度 0.008 ng/mL（LoD） 符合ESC/ACC指南要求
功能灵敏度 0.014 ng/mL（CV≤10%） 可检测微小损伤
特异性 不与骨骼肌TnT交叉（交叉率<0.001%） 排除横纹肌溶解干扰
抗干扰性 耐受血红蛋白≤500mg/dL，胆红素≤60mg/dL 保证结果可靠性
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