概述
人成纤维细胞生长因子21(Fibroblast Growth Factor 21, FGF-21)是一种代谢调节激素,主要由肝脏分泌,在糖脂代谢、能量平衡和胰岛素敏感性调控中发挥核心作用。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,专用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清中的FGF-21蛋白水平,适用于代谢性疾病研究和临床前评估。
产品名称 | 人成纤维细胞生长因子21(FGF-21)elisa试剂盒 | 英文名称 | FGF-21 Elisa Kit |
规格 | 48T\96T | 货号 | XG-EH0411 |
种属 | 人 | 用途 | 仅供科研实验 |
1. 检测原理(双抗体夹心ELISA)
预包被捕获抗体:微孔板包被抗人FGF-21单抗(靶向C端表位:aa 171-181)。
样本结合:FGF-21与捕获抗体特异性结合。
检测抗体孵育:加入生物素标记的抗FGF-21二抗(靶向N端表位:aa 32-44)。
信号放大:链霉亲和素-HRP复合物结合生物素。
显色定量:TMB显色→450nm测OD值,浓度与吸光度成正比。
2. 试剂盒核心组分
组分 规格说明 保存条件
预包被微孔板 96孔(可拆卸),包被单抗3H3 2-8℃(含干燥剂)
FGF-21校准品 重组人FGF-21(0、50、100、250、500、1000、2000 pg/mL) -80℃(冻干粉)
生物素标记检测抗体 克隆5B12,工作浓度1:500 -20℃(含50%甘油)
链霉亲和素-HRP 即用型溶液 2-8℃避光
样本稀释液 含1% BSA的PBS(pH 7.4) 2-8℃
3. 样本处理要求
血清/血浆(EDTA抗凝):
采集后30分钟内离心(1500×g,10min)
避免使用肝素钠(可能结合FGF-21)
细胞上清:
离心(300×g,5min)去除细胞碎片
稳定性:
2-8℃:≤72小时
-80℃:≤2年(避免>3次冻融)
4. 关键性能参数
参数 指标 临床相关性
检测范围 25-2000 pg/mL 覆盖生理/病理浓度
灵敏度 8 pg/mL(最低检出限) 可检测基线水平
精密度 板内CV <6%,板间CV <10% 满足实验室质控要求
特异性 不与FGF-19/23交叉(交叉率<0.01%) 确保检测特异性
回收率 92-107%(血清验证) 反映方法准确性
5. 操作流程(90分钟版)
加样:标准品/样本(50μL/孔)→室温孵育30分钟
洗涤:自动洗板机洗5次(350μL/孔)
加检测抗体:50μL/孔→室温孵育30分钟
加SA-HRP:50μL/孔→室温孵育15分钟
显色:TMB(100μL/孔)→避光反应10分钟
终止检测:终止液(50μL/孔)→450/570nm读值
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