赖氨酸(LYS)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
NR( EC 1.7.1.3 )广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
测定原理:
NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3 - +NADH+H+ → NO2 - +NAD+ +H 2 O;NADH 在 340 nm 有最大吸收峰,通过测定 NADH 减少速率来表示 NR 活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2、样本测定
在 1mL 玻璃比色皿中依次加入 50 μ L 样本上清,375 μ L 试剂一,450 μ L 蒸馏水,最后加入 125 μ L 试剂二。充分混匀后,记录 1min 时吸光值 A1 和 6min 时吸光值 A2,Δ A=A1-A2。
注 意:
1、建议使用新鲜没有冷冻过的样本。
2、一般不要诱导处理,预测定结果没有活性(ΔA≤0)则需要诱导处理。
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