赖氨酸(LYS)测定试剂盒/微量法/96样
测定意义:
赖氨酸是人体必需氨基酸之一,能促进人体发育、增强免疫功能,并有提高中枢神经组织功能的作用。赖氨酸为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为第一限制性氨基酸。。
测定原理:
蛋白质中的赖氨酸具有一个游离的 ε-NH2,它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质,其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性关系。亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同,而且仅有—个游离氨基( ε-NH2) ,所以通常用亮氨酸配制标准液。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、蒸馏水、水浴锅。测定步骤:
在有盖 EP 管中加入下列试剂
试剂名称(μL)
测定管
空白管
样本
100
提取液
工作液
200
混匀,80℃水浴30min(盖紧,以防止水分散失),冷却至常温。
试剂四
300
混匀,取 200μL 至微量石英比色皿或 96孔板中,于 530nm波长处记录吸光值 A 。△A=A测定管-A空白管。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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