乳酸(LD)测定试剂盒(测全血)/比色法/48样
测定原理:
以 NAD+ 为氢受体,LDH 催化乳酸(Lactic Acid )脱氢产生丙酮酸,使 NAD+ 转化成NADH。其中 PMS 递氢使 NBT 还原为紫色呈色物,呈色物的吸光度在 530nm 时与乳酸含量成线性关系。
操作表:
空白管
标准管
测定管
双蒸水(ml)
0.02
3mmol/L 标准液(ml)
上清液(ml)
酶工作液(ml)
1
显色剂(ml)
0.2
混匀,37℃水浴准确反应 10 分钟
终止液(ml)
2
混匀,530 nm ,1cm 光径,双蒸水调零,测定各管吸光度值。
注 意:
1 、应取空腹或静止状态下的静脉血,并避免血液淤滞,如用止血带,应在针头刺入静脉后马上放开,然后等 2 分钟后再抽血。
2、血液要新鲜,最好是当天完成,如果当天完不成,可将样本进行样本前处理后,将上清液 4℃或-20℃保存可稳定 15~30 天。
3、蛋白沉淀剂如有结晶, 则取上清进行实验。
4、在批量实验前需要进行预实验,以确定测定绝对 OD(测定 OD 值-空白 OD 值)在 0.05~0.35 之间。如果测定绝对 OD 小于 0.05,则需要加大样本浓度重新测定;如果测定绝对 OD 大于 0.35,则需要将样本稀释后重新测定。
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