DID细胞膜红色荧光探针

化学名称：1,1'- 二十八烷基 - 3,3,3',3'- 四甲基吲哚菁高氯酸盐。

分子式：C61H99ClN2O4。

分子量：959.91。

外观：红色或紫色或深蓝色固体。

溶解性：溶于 DMF、DMSO 和乙醇。

激发和发射波长：其激发波长约为 644nm，发射波长约为 663nm，呈红色荧光，可被 633nm 的氦 - 氖（He-Ne）激光激发。

荧光增强特性：DiD 在水中荧光强度很弱，进入细胞膜后，与膜结合使其荧光强度大大增强。

稳定性高：DiD 分子含两条 C18 饱和疏水长链，可深度嵌入细胞膜脂质双分子层，形成稳定的 “膜 - 染料” 复合物。荧光信号可在活细胞中维持 72-96 小时，细胞分裂或迁移时，膜荧光能均匀分配至子细胞。

特异性好：标记后仅分布于细胞膜，呈现连续的红色荧光环，内吞率极低，远低于 DiI、DiO 等其他荧光染料。

低聚集性：分子结构对称性高，在细胞膜中不易发生疏水聚集，可清晰分辨细微膜结构。

深层组织与活体成像：适合标记肿瘤细胞观察其在体内的迁移与转移，也可用于标记脑片深层神经元膜，观察神经元轴突投射路径。

光敏感样本的长时程示踪：可用于标记胚胎干细胞，追踪其分化过程，或标记斑马鱼受精卵细胞膜，观察早期胚胎卵裂过程。

复杂多色实验与膜功能研究：可与其他荧光探针联用，如标记 T 细胞膜，观察免疫突触形成，或结合 FRET 技术，研究膜蛋白二聚化等。

染色浓度：活细胞推荐浓度为 1-3μM，固定细胞可提高至 3-5μM。

成像保护：使用含抗淬灭剂的培养基，可减少染料光漂白，低温保存可进一步降低内吞率。

参数设置：流式细胞术使用 633nm 激光激发，660/20nm 带通滤光片收集信号；共聚焦显微镜选择 633nm 激光，650-700nm 发射滤光片。