土壤汞(S-Hg)浓度测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
土壤汞污染能够通过食物链传递和富集,对植物、动物和人类健康产生威胁。矿山开发、工业加工、农业生产和生活垃圾常常造成土壤汞污染,因此评价和防止土壤重金属污染常常需要测定土壤汞含量。
测定原理:
土壤经消化后,汞以 Hg2+离子形式存在;Hg2+能与二硫腙生成橙色络合物,溶于三氯甲烷后,在 490nm 测定吸光度,即可计算 S-Hg 含量。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、恒温水浴锅、可调式移液枪、100 目筛(可更小)、浓硫酸、浓盐酸、浓硝酸、三氯甲烷和蒸馏水。
S-Hg 测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min ,体积波长到 490 nm,三氯甲烷调零。
2. 样品管:风干的土壤,过 100 目筛后精确称取 0.1 g 左右,装入 EP 管;加入 1 mL 试剂一,充分混匀后沸水浴消化 60 min。取出冷却后室温 8000g 离心 10min,吸取 20 μL 上清液加入新的 EP 管;再先后加入 180 μL 蒸馏水和 20 μL 浓硫酸,混匀;最后加入 180 μL 试剂二,混匀后 40℃水浴24h,期间震荡数次。
3. 取 EP 管,加入 20 μL 标准液,180 μL 蒸馏水和 20 μL 浓硫酸,混匀;最后加入 180 μL 试剂二,混匀后 40℃水浴24h,期间震荡数次。
4. 加入 10 μL 试剂四,充分混匀后静置 5min;加入 50μL 试剂五,盖紧后震荡至少 1min ,静置 10min 以分层。
5. 小心吸取 20 μL 下层溶液,加入 200 μL 试剂六,震荡使无色,静置 10 min 以分层。
6. 小心吸取 140 μL 下层溶液,加入微量玻璃比色皿/96 孔板,于 490nm 处比色,记录各管吸光值。记为 A样品管和 A 标准管。
注 意:
1 、试剂一有刺激性气味,易挥发,实验过程中应注意佩戴口罩和手套,使用完立即盖好盖子,以免试剂不够;
2 、测定过程中需加入浓硫酸,加浓硫酸时需注意,避免溅到皮肤或眼睛上;
3 、静置分层后,用 1mL 移液枪,排除空气后,轻轻插入下层溶液中,缓慢吸取下层溶液。
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