乙酰胆碱转移酶(ChAT)测定试剂盒(测血清)/比色法/20样
测定意义:
乙酰胆碱 Ach 是调节食道平滑肌运动的主要的兴奋性神经递质。食道平滑肌收缩主要是由于 Ach 释放引起。而乙酰胆碱转移酶(Choline acetyltransferase ChAT)和乙酰胆碱脂酶(Acetylcholinesterase ACHE)分别是 Ach的合成酶和水解酶,调节 Ach 的代谢。食道组织中这两个酶的活力代表了食管内源性胆碱能神经功能状态。
测定原理:
它是通过胆碱乙酰转移酶的作用,由胆碱与来自线粒体的乙酰辅酶 A 所合成。在获得释放后,乙酰胆碱刺激特殊的胆碱能受体,这种相互作用很快被局部的胆碱酯酶所终止,后者使乙酰胆碱被水解为胆碱与乙酸盐。乙酰胆碱的水平由胆碱乙酰转移酶和胆碱的摄取所调控。
实验仪器:
试管、微量移液器、旋涡混匀器、37℃水浴箱(气浴箱)、低速离心机、可见分光光度计(324nm)。操作过程:
测定管
对照管
试剂一 (μl)
52.5
试剂二(μl)
2.5
试剂三(μl)
5
试剂四(μl)
试剂五(μl)
试剂六 (μl)
混匀,37 °C 水浴预温 5 分钟
5%的组织匀浆上清(1)
10
煮沸的匀浆上清 10
混匀,37 °C 水浴 20 分钟,100 °C 沸水水浴 2 分钟终止反应
蒸馏水 (l)
425
混匀,4000 r/min×10min 离心后取上清进行显色反应
上清(l)
450
试剂七(l)
静置 15 分钟,在 324nm 处,用 1cm 光径,2mm 内径的石英比色皿, 蒸
馏水调零,测定各管的吸光度值。
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