莽草酸脱氢酶(SD)测定试剂盒/微量法/96样
测定意义:
莽草酸途径是存在于植物、真菌和微生物中的一条重要的代谢途径,莽草酸脱氢酶是莽草酸合成途径中的关键酶。
测定原理:
莽草酸脱氢酶催化莽草酸和 NADP 产生 NADPH ,检测 340nm 下的吸光值增加速率来表示 SD 活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:
1 、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2 、样本测定
(1)在试剂二中加入 10mL 试剂一充分溶解混匀,置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 5min,现配现用。
(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本和 190μL 试剂二,混匀,立即记录 340nm 处 20s 时的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2 ,计算 ΔA=A2-A1。注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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