OVA-CY5:荧光染料Cy5标记卵清白蛋白
OVA-CY5是荧光染料Cy5标记的卵清白蛋白,其中Cy5属于近红外菁类荧光染料,其激发波长约为640-650nm,发射波长约为660-670nm,荧光颜色处于近红外光区域。近红外光具有组织穿透能力强、生物样品自发荧光干扰小等独特优势,可有效减少生物体内血红蛋白、水等物质对光的吸收和散射,提高检测的信噪比;而卵清白蛋白(OVA)作为优良的载体蛋白,可赋予Cy5良好的水溶性和生物相容性,避免Cy5在水溶液中聚集,同时减少其在体内的非特异性结合,因此OVA-CY5在活体成像、体内药物追踪等领域具有不可替代的作用。
该标记物的制备常采用活化酯法,核心是实现Cy5与OVA的高效稳定共价结合。首先对Cy5染料进行活化,引入N-羟基琥珀酰亚胺酯活性基团,生成Cy5-NHS酯;随后将Cy5-NHS酯与OVA溶液混合,在无菌、低温(4℃)环境下进行偶联反应,Cy5-NHS酯中的NHS基团与OVA分子上的氨基发生特异性酰胺化反应,形成稳定的共价结合产物。在偶联反应过程中,需严格控制反应条件:pH值调节至7.4左右,接近生理pH环境,既能保证偶联效率,又可*大限度保留OVA的生物活性;通过精确控制Cy5与OVA的摩尔比、反应时间,实现理想的标记率。反应结束后,采用凝胶过滤层析和透析相结合的方法进行纯化,彻底去除游离的Cy5染料和反应副产物,确保OVA-CY5的纯度和荧光稳定性。
OVA-CY5的应用主要集中在需要深层组织穿透和低背景干扰的实验场景。在活体荧光成像中,它可作为示踪剂,通过静脉注射等方式进入生物体内,利用近红外光的强穿透性,实时监测其在体内的分布、代谢和排泄过程,为肿瘤诊断、药物递送系统评估等提供直观的影像学数据,例如在肿瘤靶向治疗研究中,可清晰观察药物载体在肿瘤组织的富集情况;在流式细胞术分析中,由于其发射波长远离细胞自发荧光区域,可有效降低背景噪音,提高检测的灵敏度和准确性,适用于稀有细胞群体的检测,如循环肿瘤细胞的筛选;此外,在免疫印迹、免疫组化等实验中,OVA-CY5标记的抗体可用于目标蛋白的高灵敏检测,尤其适用于低表达蛋白的分析,为疾病的病理机制研究提供重要依据。
使用OVA-CY5时需特别注意以下几点:一是储存环境,需在-20℃避光、干燥条件下密封保存,避免反复冻融和接触水分,以防荧光染料水解和蛋白变性;二是检测仪器,需使用具备近红外检测通道的荧光显微镜、流式细胞仪等设备,并正确设置激发光和发射光波长,以获得*佳的荧光信号;三是体内实验注意事项,用于活体实验时,需严格控制给药剂量,确保生物安全性,同时选择合适的检测时间点,避免因染料代谢导致荧光信号减弱;四是抗淬灭措施,在体外检测时,可使用专用的近红外抗淬灭剂,减少荧光淬灭,保证检测结果的稳定性;五是避免氧化环境,Cy5染料易被氧化,实验过程中应尽量在低氧环境下进行,可使用氮气保护。
用途:科研
包装:瓶装
产地:西安瑞禧生物科技有限公司

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