CY3-Avidin 菁染料CY3标记亲和素

CY3-Avidin：菁染料CY3标记亲和素

CY3-Avidin是将菁染料CY3与亲和素（Avidin）通过特异性化学偶联制备而成的荧光共轭试剂，依托亲和素-生物素系统的高特异性高亲和结合特性与CY3染料的优良荧光性能，在生物医学检测、分子生物学研究等领域发挥重要作用。亲和素作为核心结合单元，与链霉亲和素功能类似，但来源与结构存在差异，而CY3染料的明亮橙色荧光则为靶标分子的可视化检测提供了可靠的信号保障。

亲和素是一种从蛋清中提取的糖蛋白，分子量约68 kDa，同样为四聚体结构，每个亚基可特异性结合一个生物素分子，结合常数高达10¹⁵ M⁻¹，与生物素的结合具有高度特异性与稳定性。与链霉亲和素相比，亲和素分子表面含有较多的糖基化位点，等电点更高（pI约10.5），在某些实验条件下可能存在一定的非特异性结合，但凭借来源广泛、成本较低的优势，仍被广泛应用。CY3是一种常用的菁类荧光染料，*大激发波长约550 nm，*大发射波长约570 nm，发出明亮的橙色荧光，荧光量子产率高，光稳定性好，易于观察与检测，且可与其他荧光染料（如FITC、Cy5）搭配使用，实现多色荧光成像。CY3-Avidin的制备采用N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化法：首先利用NHS活化CY3分子上的羧基，形成活性酯中间体；再将活化后的CY3与亲和素在适宜的缓冲体系（如PBS，pH 7.2-7.4）中进行孵育反应，活性酯中间体与亲和素分子表面的氨基发生酰胺化反应，形成稳定的共轭键；反应完成后，通过凝胶过滤层析去除未反应的游离CY3染料和杂质，确保产品的高纯度与均一性。优质的CY3-Avidin标记率通常为2-4个CY3分子/亲和素四聚体，亲和素生物素结合活性保持率不低于85%。

应用场景方面，CY3-Avidin广泛用于免疫荧光成像、流式细胞术分析、荧光原位杂交（FISH）、蛋白质印迹（Western Blot）等实验。在免疫荧光成像中，可先将生物素标记的一抗与样本中的靶蛋白结合，再加入CY3-Avidin作为荧光二抗偶联物，通过荧光显微镜观察靶蛋白的定位与表达水平，其明亮的橙色荧光可有效区分于其他荧光信号，适用于多色标记实验；在流式细胞术分析中，可与生物素化的细胞表面标志物抗体结合，对细胞群体进行分类与定量分析，广泛应用于免疫学研究、临床诊断等领域；在FISH实验中，可用于标记生物素化的核酸探针，实现染色体或基因片段的精准定位，助力遗传病诊断与基因表达调控研究；在Western Blot实验中，可作为信号检测试剂，与生物素化的一抗或二抗结合，通过荧光成像系统检测目标蛋白的条带，实现对目标蛋白的定性与半定量分析。

使用CY3-Avidin时需注意以下事项：储存时应置于-20℃避光密封保存，建议分装储存，避免反复冻融导致荧光基团降解和蛋白变性；使用前需在冰上缓慢解冻，并用合适的缓冲液（如PBS，pH 7.2-7.4）进行稀释，稀释过程中应轻轻混匀，避免剧烈震荡；实验过程中需严格避光操作，尤其是在孵育和成像阶段，减少荧光淬灭；孵育温度建议控制在室温或37℃，孵育时间根据实验需求调整为30-60分钟，确保特异性结合充分；由于亲和素存在一定的非特异性结合倾向，可在孵育液中加入适量的封闭剂（如BSA、脱脂奶粉），降低非特异性结合；同时，需避免使用含有强氧化剂、还原剂的缓冲体系，以免破坏染料结构与偶联键。

用途：科研

包装：瓶装

产地：西安瑞禧生物科技有限公司  

关于我们：

西安瑞禧生物科技有限公司是一家专注于新型功能材料与生物试剂研发、生产及销售的科技型企业。公司产品涵盖纳米材料、荧光微球、高分子材料、功能性修饰载体以及相关定制化服务，广泛应用于生物医学研究、体外诊断、药物递送、材料科学等领域。瑞禧生物依托技术团队和实验平台，能够为科研机构与企业提供产品和个性化解决方案。公司始终坚持“创新驱动，品质为先”的理念，致力于推动科研与产业应用的融合发展，为客户提供专业、稳定和可靠的材料支持与技术服务。 

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